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Phusion RT-PCR Kit

 
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运费与支付说明:

1.含干冰类产品有运费;

2. 必须现金付款或有信用额度的会员才可以直接发货,否则需要等待现金付款信息。

其它组分:

RT enzyme mix (M-MuLV RNase H + RT + RNase inhibitor)【包装:1 x 40 µl 】
10x RT Buffer (includes 50 mM MgCl2) 【包装:1 x 1.5 ml】
Oligo(dT) primers【包装:1 x 20 µl】
Random primers (hexamers)【包装:1 x 20 µl】
dNTP Mix【包装:1 x 40 µl 】
Phusion Hot Start II DNA Polymerase【包装:1 x 10 µl】
5x Phusion HF Buffer【包装:1 x 1.5 ml 】
Control RNA with carrier【包装:1 x 20 µl】
Control primer mix【包装:1 x 20 µl】


描述:

Thermo Scientific Phusion RT-PCR Kit用于两步法高保真RT-PCR实验。该试剂盒包括cDNA合成和PCR扩增所需的全部试剂。第一步中,M-MuLV 逆转录酶可以以不同种类的RNA为模板,并利用各类引物高效合成cDNA。在第二步中,Phusion Hot Start II High Fidelity DNA Polymerase则可用于cDNA的PCR扩增。这种聚合酶有着优异的保真度和扩增能力,且带有热启动修饰,可以使PCR反应更为特异。Phusion Hot StartII High Fidelity DNA Polymerase的这些优异特性,不仅可以使cDNA扩增的保真度更高,还能在缩短循环时间的同时,提高扩增产物的得率。当需要制备用于克隆和基因表达研究的cDNA时,Phusion RT-PCR试剂盒是一种理想的选择。

优点:
• 产量高
• cDNA扩增保真度高,其保真度是Taq酶的52倍
• 简单快速的cDNA合成和PCR扩增
• 易用:完整的两步法RT-PCR试剂盒

应用:
• 基因表达分析
• 制备具有优异保真度的cDNA产物,以用于克隆和测序


使用Phusion RT-PCR系统进行强劲而高产的cDNA扩增
在扩增短cDNA片段(192-1113bp)的典型RT-PCR实验中,将Phusion RT-PCR 系统与市场上两个主要供应商的RT-PCR系统进行了比较。用随机引物转录来自人骨骼肌的总RNA。用厂家各自推荐的高保真DNA聚合酶进行cDNA扩增。由于扩增子长度不同,因此在PCR反应中,采用的是最低的退火温度和最长的延伸时间。强劲的Phusion RT-PCR Kit扩增得到了全部11个扩增子,且保持了最高的产物得率。


Phusion RT-PCR Kit扩增长RT-PCR片段
使用Phusion RT-PCR Kit 对长度为3.3kb、6kb、8kb和10kb的人dystrophin mRNA进行了逆转录和扩增。使用了Oligo (dT)16引物,起始模板为人骨骼肌总RNA(50 ng) 。


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参考文献

本产品可用于的实验

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