IEF是2-D电泳的第一向电泳，也是一个独立的分离蛋白质的技术。IEF凝胶（用于等电聚焦）分离蛋白是基于蛋白分子的静

电荷而不是分子量。IEF凝胶由两性电解质载体铺制而成，从而在凝胶中产生pH梯度。蛋白质迁移到它的等电点处，达到第一向

的等电聚焦分离。

   预制IEF胶将pH梯度固定在易于操作的支撑条上，从而简化第一维分离。并且预制IEF胶经过充分的质量和性能测试，可提

供凝胶到凝胶的重复性。

IEF的分离容量受下列因素影响：

1、聚焦后每一区带的蛋白量取决于密度梯度所能支持的蛋白质，提高密度可以提高分离容量。

2、容量与区带高度的平方成正比，降低电压可使区带变宽，提高容量，但分辨率降低，聚焦时间长，用窄的pH梯度范围可以使

区带变宽，提高分辨率。

3、分离的容量与柱的横载面成正比，用440毫克柱时，可加粗蛋白5克，每一区带可达1克。