PinPoint? Xa Protein Purification System

产品编号：V2020 品牌：promega 原厂货号：V2020
产品分类：蛋白质表达与纯化 > 蛋白纯化 > 亲和柱
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其它组分：

SoftLink™ Soft Release Avidin Resin【子货号：V201C，包装：1 x 3ml，，运保温度：4°C】

PinPoint™ Xa-1 Vector【子货号：V203A，包装：1 x 10μg，，运保温度：–20°C】

PinPoint™ Xa Control Vector【子货号：V204A，包装：1 x 5μg，，运保温度：–20°C】

PinPoint™ Xa-2 Vector【子货号：V205A，包装：1 x 10μg，，运保温度：–20°C】

PinPoint™ Xa-3 Vector【子货号：V206A，包装：1 x 10μg，，运保温度：–20°C】

PinPoint™ Purification Column【子货号：V556A，包装：1 x 1 each，，运保温度：室温】

Biotin【子货号：V557A，包装：1 x 1ml，，运保温度：4°C】

Streptavidin Alkaline Phosphatase【子货号：V559A，包装：1 x 20μl，，运保温度：4°C】

描述：

说明

PinPoint™ Xa Protein Purification System (PinPoint™ Xa 蛋白纯化系统) 被设计用于制备和纯化体内表达的生物素化的融合蛋白。将编码目的蛋白的DNA 克隆到PinPoint™ Vector(PinPoint™ 载体) 的下游，该位置编码的肽段在体内可被生物素化。生物素化融合蛋白在大肠杆菌内生成，然后用SoftLink™ Soft Release Avidin Resin 进行亲和纯化。该树脂是基于专利技术设计的，可将融合蛋白以非变性形式洗脱出来。PinPoint™ Vector(PinPoint™ 载体) 的特点是含有编码内源蛋白酶因子Xa( 发音为"ten a") 的蛋白水解位点，使得纯化标签可从天然蛋白上分离。载体还带有多克隆区域，便于方便地构建融合蛋白。

该系统中含有几种载体，这些载体涵盖了所有可能的有义读码框。此外，该系统还包含有抗生物素蛋白偶联的树脂、链霉亲和素- 碱性磷酸酶、纯化柱和生物素。系统中的PinPoint™ Xa Control Vector(PinPoint™ Xa 对照载体) 含有氯霉素转乙酰基酶(CAT) 基因，用于监控蛋白表达、纯化和加工条件。使用该系统，每升培养物通常的蛋白产量为1-5mg。

特点

• 体内自行添加生物素标签：可用于纯化融合蛋白；很多蛋白纯化产物都是可溶的。

• 易于使用：使用SoftLink™ 树脂纯化带有生物素标签的蛋白质，可以借助纯化柱，也可以进行批量处理。

• 便于检测：链霉亲和素碱性磷酸酶可用于检测带生物素标签的融合蛋白，以虚拟Western 方式，监控纯化过程。

• 灵活：提供的PinPoint™ 载体涵盖了所有读码框。

• 温和的释放条件：使用SoftLink™ 树脂时，可在非变性条件下释放融合蛋白。

• tac 启动子：可以严格调控蛋白表达。

原厂资料：

The PinPoint™ Xa Protein Purification System is designed for the production and purification of fusion proteins that are biotinylated in vivo. The DNA coding for the protein of interest is cloned into a PinPoint™ Vector downstream of a sequence encoding a peptide that becomes biotinylated in vivo. Biotinylated fusion proteins are produced in E. coli and are affinity-purified using the SoftLink™ Soft Release Avidin Resin. This proprietary resin allows elution of the fusion protein under nondenaturing conditions. The PinPoint™ Vectors feature the encoded endoproteinase Factor Xa (pronounced "ten a") proteolytic site that provides a way to separate the purification tag from the native protein, and the vectors carry a convenient multiple cloning region for ease in construction of fusion proteins.

The system contains vectors in all possible sense reading frames, an avidin-conjugated resin, Streptavidin-Alkaline Phosphatase, a purification column and biotin. The PinPoint™ Xa Control Vector contains the chloramphenicol acetyltransferase (CAT) gene and is provided as a means of monitoring protein expression, purification and processing conditions. The system generally yields 1–5mg of protein per liter of culture.

Features - Benefits

In vivo Biotinylation Tag: Allows purification of fusion proteins; many proteins produced have been soluble.
Easy to Use: Purification of biotinylated proteins with the SoftLink™ Resin can be performed by column or batch purification.
Easy Detection: Streptavidin Alkaline Phosphatase can be used to detect the biotinylated fusion protein in a pseudo-Western format to monitor purification.
Flexible: PinPoint™ Vectors are supplied for all reading frames.
Gentle Release Conditions: SoftLink™ Resin allows release of the fusion protein under nondenaturing conditions.
tac Promoter: Allows tightly regulated expression.

Applications

Purification of milligram amounts of expressed protein.
Production of novel bioreagents.