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DharmaFECT Duo Transfection Reagent

 
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描述:

为siNRA和质粒共转染所优化的高效、超低毒性转染试剂DharmaFECT Duo是一种全新的可高效共转染siRNA和质粒的转染试剂。而上述DharmaFECT 1,2,3和4则仅是针对siRNA单独转染的优化产品。虽然共转染siRNA和质粒进行报告基因系统研究越来越普遍,但对应的能够高效共转染siRNA和质粒的转染试剂则很匮乏;大部分的研究者依然运用传统的质粒转染试剂进行siRNA转染或者siRNA和质粒的共同转染,但是这些试剂没有经过转染条件的优化,往往对细胞活力产生很大的毒副作用。基于此,Dharmacon公司推出的具有在保持细胞高活力的情况下高效共转染siRNA和质粒的DharmaFECT Duo转染试剂。

在一对一的共转染比较实验中,唯独DharmaFECT Duo转染试剂比其它任何转染试剂有更高的siRNA和质粒的共转染效率,具体表现为被转染质粒的高效表达和siRNA所诱导基因的高效沉默(见下图)。


Figure. DharmaFECT Duo achieves optimal co-transfection results - effectiv plasmid delivery (black bars) and target mRNA knockdown (blue bars) when compared to other lipid reagents. The psiCHECK 2 Vector (Promega; 100 ng/well) and siRNA targeting renilla luciferase (100 nM) were complexed with a range of transfection reagent volumes (0.05 - 0.6 μL/well) to determine optimal co-transfection conditions (shown). Firefl y Luciferase expression was assessed at 48h using the Dual-Glo™ Luciferase Assay System (Promega). Cell viability was assessed using the alamarBlue® Assay (Biosource International). siRNA-induced Renilla luciferase knockdown (blue bars) was assessed by branched DNA assay (Panomics).

 
DharmaFECT Duo转染试剂在众多细胞系的实验结果均表现出众,下面列举出几种常见细胞系转染后的细胞活力和基因沉默效果检测。
 
表. DharmaFECT ® Duo 转染试剂在众多细胞系的卓越性能表现(96孔细胞培养板)
细胞系
细胞活力测定 (%)
靶基因沉默效果 (%)
转染细胞密度 (cells/mL)
转染试剂使用体积(μL/well)
ES-D3
87
97
2.0×105
0.3
HeLa
79
81
2.0×105
0.1
HepG2
72
91
2.0×105
0.05
Jurkat
89
96
6.0×105
0.6
MCF7
80
99
1.0×105
0.2
MCF10a
78
98
1.0×105
0.2
NIH/3T3
83
97
1.0×105
0.4
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 


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