NmeAIII

产品编号：R0711L 品牌：New England Biolabs 原厂货号：R0711L
产品分类：克隆 > 限制性内切酶和连接酶 > 限制性内切酶 > N
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描述：

识别位点：

在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1:10%

NEBuffer 2:10%

NEBuffer 3:0%

NEBuffer 4:100%

来源

重组 E. coli 菌株，包含有从 Neisseria meningitidis 2491 (M.Achtman) 克隆的 NmeAIII 基因。

反应缓冲液

NEBuffer 4 + SAM。

连接和再切

经过 NmeAIII 5 倍过量消化，> 95% 的 DNA 片段能被连接，连接片段中 < 5% 能被再切。

浓度

2,000 units/ml，通过 φX174 RF I DNA 鉴定。

热失活

80℃ 20 分钟。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项：

1．NmeAIII 需 2 个拷贝的识别序列才能进行切割。因此，只有单一识别位点的 pUC19 不能被切割。NmeAIII 10 倍过量消化时，仅有不到 50% 的DNA 会被切割。建议消化每 μg DNA，酶量不 > 5个单位，反应时间不 > 1 小时。
2．冰浴或 25℃ 温育时，也能有效切割。
3．即使过量酶切，NmeAIII 也是进行部分酶切的一种稳定模式。1 单位即被定义为产生这种稳定部分酶切产物所需的酶量。
4．为保证酶具有最佳活性，需添加 SAM (随酶提供) 。