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I-CeuI

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描述：

在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1:10%

NEBuffer 2:10%

NEBuffer 3:0%

NEBuffer 4:100%

概述

I-CeuI 是一种内含子编码的归位内切酶。该内含子发现于 Chlamydomonas eugametos 叶绿体的大 rRNA 中。该基因在 E. coli 菌株中克隆并大量表达。

来源

重组 E. coli 菌株，包含有从 Chlamydomonas eugamentos (C. Lemieux) 克隆的 I-CeuI 基因。

反应缓冲液

NEBuffer 4 + BSA。

特性

该内切酶的靶序列或识别位点如下所示：

5´...CGTAACTATAACGGTCCTAAGGTAGCGAA...3´
3´...GCATTGATATTGCCAGGATTCCATCGCTT...5´

连接和再切

经过 I-CeuI 20 倍过量消化，超过95% 的 DNA 片段能够被连接和再切。

单位定义

1 个单位指 50 μl 反应体系中，37℃ 条件下 3 小时酶解 1 μg ScaI 线性化的 pBHS DNA 所需要的酶量。

浓度

5,000 units/ml。

热失活

65℃ 20 分钟。

注意事项：

归位内切酶没有严格定义的识别序列。