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PI-SceI

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描述：

在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1:0%

NEBuffer 2:0%

NEBuffer 3:0%

NEBuffer 4:0%

概述

编码 PI-SceI 的内含肽存在于 Saccharomyces cerevisiae 的 VMA ATPase 基因中。该基因经修饰可
用 T7 RNA 聚合酶表达系统，在 E. coli 菌株中独立表达。

来源

重组 E. coli 菌株，包含有从 Saccharomyces cerevisiae (J.Thorner) 克隆的 VMA1 ATPase 基因。

反应缓冲液

NEBuffer PI-SceI + BSA。

特性

该内切酶的靶序列或识别位点如下所示：

5´...ATCTATGTCGGGTGCGGAGAAAGAGGTAATGAAATGG...3´
3´...TAGATACAGCCCACGCCTCTTTCTCCATTACTTTACC...5´

连接和再切

经过 PI-SceI 10 倍过量消化，> 95%的 DNA 片段能够被连接和再切。

单位定义

1 个单位指 50 μl 反应体系中，在 37℃条件下 3 小时完全酶解 1 μg XmnI 线型化 pBSvdeX DNA 所需要的酶量。

浓度

5,000 units/ml。

热失活

65℃ 20 分钟。

注意事项：

归位内切酶没有严格定义的识别序列。