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Nt.CviPII

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描述：

识别位点：

在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1:25%

NEBuffer 2:100%

NEBuffer 3:50%

NEBuffer 4:100%

概述

Nt.CviPII 是切刻内切酶，它仅切割双链 DNA底物的一条链。切割 pUC 19 DNA 的产物为 25 至 200 bp 的片段。CCT 的切割效率低于 CCG 和 CCA。有些 CCT 位点不会被切割。

来源

重组 E. coli 菌株，包含有从 Chlorella virus NYs-1 (J.L.Van Etten) 克隆并与 MxeGyrA 内含肽、几丁质结合结构域融合表达的内刻限制性内切酶Nt.CviPII 基因。

反应缓冲液

NEBuffer 4。

单位定义

1 个单位指 50 μl 反应体系中，在 37℃条件下 1 小时将 1 μg pUC19 DNA 完全切割成 25 至 200 bp 稳定片段所需的酶量。

浓度

5,000 units/ml，通过 pUC19 DNA 鉴定。

热失活

65℃ 20 分钟。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 甲基化不敏感，对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感。

注意事项：

实验证明该酶还具有内切酶活性，因此在大多数反应中建议最佳反应时间为 1 小时。电泳检测时，建议上样缓冲液中 SDS 终浓度为 0.4%。