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miRNeasy Mini Kit (50)

  • 产品编号:Q-217004      品牌:Qiagen       原厂货号:217004
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描述:

性能

使用miRNeasy Mini Kit纯化含有miRNA的总RNA,可用于与管家基因或其他目的mRNA进行miRNA表达水平的直接比较。对于某些比较灵敏的下游应用,还需要富集得到不含有大分子RNA的miRNA组分。miRNeasy Mini Kit可高效富集至少含18个核苷酸以上的RNA。相比于使用其他试剂盒纯化的样本,使用miRNeasy Mini Kit纯化后的小RNA更清晰可见(参见Effective enrichment of small RNA)。miRNeasy Kits可从组织和细胞中纯化RNA,即使初始样本量较低也可确保高效纯化。随着纯化RNA的细胞或组织量的降低,CT值呈线性增长,说明可从较大范围的初始样本中高效纯化miRNA(参见Effective purification from a range of starting amounts)。

该试剂盒可从多种组织和细胞中纯化RNA,包括难裂解的组织(参见Efficient copurification from a wide range of tissues)。miRNeasy流程可有效避免盐类或苯酚污染等影响后续分析的可能性(参见Highly pure RNA without phenol carryover)。miRNeasy Kits与其他纯化miRNA的方法相比,如TRIzol Reagent,不仅纯度更高,还可得到更高产量(参见miRNeasy Kit outperforms TRIzol)。使用miRNeasy Kits制备的RNA纯度高,可直接用于各种灵敏的下游应用。

原理

miRNeasy Mini Kit将苯酚异硫氰酸胍样本裂解技术与硅胶膜总RNA纯化技术相结合。该试剂盒包含的QIAzol Lysis Reagent,为苯酚与异硫氰酸胍的单相溶液,用于促进组织的裂解并抑制RNases,同时除去有机溶剂萃取产物中的绝大部分细胞DNA以及蛋白质。

操作流程

miRNeasy Mini Kit可纯化18个核苷酸(nt)以上的总RNA,也可分别纯化富集后的miRNA组分和总RNA(>200 nt)组分(参见miRNeasy procedures)。单独纯化的富集后的miRNA组分可能需要减弱背景干扰,以便用于某些比较灵敏的下游应用。在这种特定情况下,对miRNA和RNA(<200 nt)进行富集需要RNeasy MinElute Cleanup Kit。

miRNeasy Mini Kit可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动纯化含有miRNA的总RNA。独创的QIAcube全自动核酸纯化仪应用先进技术处理QIAGEN离心柱,实现低通量样本自动化制备与实验室流程的无缝结合。使用QIAcube全自动核酸纯化仪制备样本与手工操作步骤相同(即裂解、结合、洗涤和洗脱),确保使用miRNeasy Mini Kit能持续纯化高品质的RNA。更多关于自动化流程的信息,参见相关的实验方案。

应用

miRNeasy Mini Kit对含有miRNA的总RNA的纯化适合多种下游应用,包括:

Northern印迹分析

定量real-time RT-PCR

微阵列分析

 

Feature

Specifications

Applications

PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray

Elution volume

30 µl

Format

Spin column

Main sample type

Tissue, cells

Processing

Manual (centrifugation or vacuum)

Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein

miRNA, total RNA

Sample amount

50–100 mg

Technology

Silica technology

Yield

Varies

 


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参考文献

本产品可用于的实验

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