HotStarTaq DNA Polymerase (5000)

产品编号：Q-203207 品牌：Qiagen 原厂货号：203207
产品分类：PCR/RT-PCR/qRT-PCR > PCR > 热启动PCR
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描述：

性能

每一批HotStarTaq DNA Polymerase都经过全方位的质量控制测试，包括：严格的PCR特异性和具有可重复性的试剂，即使低拷贝的靶分子也可扩增。通过检测，HotStarTaq DNA Polymerase可确保高度特异性和在热启动PCR中的卓越表现（参见Higher specificity with different primer–template systems、Superior performance和表格）。该试剂盒提供的新型PCR缓冲液使得在多种PCR条件下都维持高特异性，无需优化（参见Wide annealing temperature window和Tolerance to variable magnesium concentration）。试剂盒中的Q-Solution可进一步优化PCR（参见Amplification of difficult templates）。总之，这些组合确保了在多种应用中的特异性扩增（参见Effect of hot start on RT-PCR performance和Highly sensitive single-cell PCR）。

热启动模式比较	HotStarTaq DNA Polymerase	Supplier A_II提供的热启动酶	抗体介导	手动	蜡屏障
特异性扩增	++	+	+	+/–	+/–
PCR优化需求	++	+/–	+/–	–	–
易用性	++	++	+	–	–

HotStarTaq DNA Polymerase特性

浓度：5 units/µl
重组酶：是
底物类似物：dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、fluorescent-dNTP/ddNTP
延伸速度：72°C条件下2–4 kb/min
酶半衰期：97°C条件下10 min，94°C条件下60 min
扩增效率：≥10⁵倍
5'–>3'外切酶活性：是
额外添加A：是
3'–>5' 外切酶活性：否
核酸酶污染：否
蛋白酶污染：否
RNases污染：否
自启活性：否

原理

HotStarTaq DNA Polymerase，一种经修饰的Taq DNA Polymerase，确保热启动PCR的高度特异性。该试剂盒包括新型的双阳离子PCR缓冲液、Q-Solution和MgCl₂。

HotStarTaq DNA Polymerase

HotStarTaq DNA Polymerase以非活性形式提供，常温下没有聚合酶活性。避免PCR构建和循环初始阶段低温条件下非特异性引物的延伸和引物二聚体的形成（参见Superior performance in hot-start PCR和Higher specificity with different primer–template systems）。95°C条件下孵育15分钟即可激活HotStarTaq DNA Polymerase，这个步骤可整合入已有的热循环程序中。

QIAGEN PCR Buffer

QIAGEN PCR Buffer通过提高每个PCR扩增退火过程特异性引物的结合比例，确保PCR每个循环特异性扩增（参见Increased specificity of primer annealing）。独特的KCl和(NH₄)₂SO₄平衡组合，使得该缓冲液与传统的PCR缓冲液相比在很宽的温度和Mg²⁺浓度范围内都有严格的引物退火条件和高度的特异性，无需进行耗时的优化（参见Wide annealing temperature window和Tolerance to variable magnesium concentration）。

Q-Solution

该产品同时提供Q-Solution，一种新型的PCR添加剂，通过更改DNA熔解行为促进难扩增模板的扩增。这种独特的试剂可进一步优化由模板引起的表现不理想的PCR，如过多的二级结构和富含GC的模板（参见Amplification of difficult templates）。不同于DMSO和其他PCR添加剂，Q-Solution的浓度是确定的，没有毒性，并且保证PCR的纯度。而且PCR中加入Q-Solution不会影响PCR的准确性。

操作流程

HotStarTaq DNA Polymerase提供高效、经优化的实验方案，用于快速、方便的构建PCR反应体系。95°C条件下孵育15分钟激活HotStarTaq DNA Polymerase，可以整合入已有的热循环程序。反应可在室温下建立，更加方便和易于使用（参见HotStarTaq procedure）。

应用

HotStarTaq DNA Polymerase适合多种应用，包括各种富有挑战性的研究，如各种扩增应用：

复杂的基因模板
复杂的cDNA模板（如RT-PCR）
低拷贝的靶序列（如单细胞PCR）
多重引物对反应

Feature	Specifications
Applications	PCR, RT-PCR, Complex genomic templates, very low-copy targets
Enzyme activity	5' -> 3' exonuclease activity
Mastermix	No
Reaction type	PCR amplification
Real-time or endpoint	Endpoint
Sample/target type	Genomic DNA and cDNA
Single or multiplex	Single
With/without hotstart	With hotstart

原厂资料：

性能

每一批HotStarTaq DNA Polymerase都经过全方位的质量控制测试，包括：严格的PCR特异性和具有可重复性的试剂，即使低拷贝的靶分子也可扩增。通过检测，HotStarTaq DNA Polymerase可确保高度特异性和在热启动PCR中的卓越表现（参见Higher specificity with different primer–template systems、Superior performance和表格）。该试剂盒提供的新型PCR缓冲液使得在多种PCR条件下都维持高特异性，无需优化（参见Wide annealing temperature window和Tolerance to variable magnesium concentration）。试剂盒中的Q-Solution可进一步优化PCR（参见Amplification of difficult templates）。总之，这些组合确保了在多种应用中的特异性扩增（参见Effect of hot start on RT-PCR performance和Highly sensitive single-cell PCR）。

热启动模式比较	HotStarTaq DNA Polymerase	Supplier A_II提供的热启动酶	抗体介导	手动	蜡屏障
特异性扩增	++	+	+	+/–	+/–
PCR优化需求	++	+/–	+/–	–	–
易用性	++	++	+	–	–