BACE1 FRET ASSAY KIT 400 X 400 UL ASSAYS

BACE1（β 分泌酶）是参与生成淀粉样蛋白 β 多肽 (Aβ) 的关键酶，该 β 多肽存在于阿尔茨海默氏病 (AD) 相关的胞外淀粉样斑块中。 在某些病例中，早期发作的家族 AD 疾病可归因于淀粉样前体蛋白 (APP) 的 "Swedish" 突变，这显著增强了 BACE1 对该蛋白的切割。 根据这一现象以及其它遗传和病理学证据，人们已研究出主要抑制 BACE1 和其它 APP 切割酶（如：γ 分泌酶）的治疗方法。 BACE1 荧光共振能量转移 (FRET) 分析试剂盒 (BACE1 fluorescence resonance energy transfer (FRET) Assay Kit) 提供了一种灵敏且高效的方法来筛选潜在 BACE1 抑制剂。 该试剂盒使用纯化的杆状病毒表达的 BACE1 和一种基于 "Swedish" 突变的新型红色 FRET 多肽底物。 BACE1 FRET 分析试剂盒 (BACE1 FRET Assay Kit) 具有如下特点：

• 发射红光，减少了复合物干扰

• 激发波长为 545 nm，读取的发射波长为 585 nm

• 在溶液中进行的方便、快速的均相分析

• 具有通用形式，适用于高通量筛选

• 稳定的结果–可在长达 24 小时的时间内进行测量

• 可靠的性能–Z´=0.67

BACE1 FRET 分析的原理如下： 该多肽底物由荧光供体（罗丹明 (Rh) 衍生物）和特有的淬灭受体这两种荧光基团合成。 这两种基团之间具有合适的距离，在受到光激发时，受体 (A) 通过称为共振能量转移的量子力学现象显著淬灭供体 (D) 荧光能量（图 1）。 经蛋白酶切割后，荧光供体与淬灭基团分离，恢复了供体的全部荧光量。 因此，经酶法切割，弱荧光多肽底物的荧光会增强；荧光增量与蛋白质水解程度呈线性相关。BACE1 酶来源： 编码人 BACE1 1-460 位氨基酸的 cDNA 序列（对应于胞外域）在重组杆状病毒感染的昆虫细胞中表达。 纯化的 BACE1 以 BACE1 前体形式存在，BACE1 前体具有 55 kDa 的表观分子量以及 N 端序列 TQHGIRLPLR。性能与质量测试： 在 Coomassie ¤ 蓝色染料染色的 SDS-PAGE 凝胶上目测评估的酶纯度必须达到 90%。 根据试剂盒方案进行使用时，FRET 分析试剂盒 (FRET Assay Kit) 的 BACE1 活性必须能在 25°C 下，在 1 小时内裂解 5-15% 底物。