NEBlot Kit

• 产品编号：N1500L      品牌：New England Biolabs       原厂货号：N1500L
• 产品分类：生化和细胞分析 > 标签、标记试剂盒 > 其他反应探针
• 应用分类：

描述：

特性

■   制备高特异性的探针
■   在低熔点琼脂糖凝胶存在下，直接标记 DNA
■   提供了所有四种 dNTPs， 可以灵活地选择标记物  (未提供标记了的核苷三磷酸) 
■   通过标记对照 DNA， 来检测实验体系

概述

NEBlot® 试剂盒能有效制备高特异性的DNA 标记探针，适用于基因文库的筛选，South-ern 和 Northern 印迹分析和原位杂交分析。
 根据 Feinberg 和 Vogelstein 的方法， 用 8 碱基随机引物， 在 E. coli  DNA 聚合酶 I 的 Klenow 片段的作用， 以变性的双链 DNA 为模板体外合成 DNA  (见图) 。
 该方法可用于微量 DNA  (小于 25 ng) 的标记。用标记的脱氧核苷三磷酸可制备高特异性探针。此方法也可以标记低熔点琼脂糖凝胶中的 DNA， 克服了早期切口平移法的局限性。
 用该系统制备探针效果稳定， 通常用 25 ng 至 2 μg 的 DNA 在 30 分钟内就能制备比活性高于 1X 109  dpm/μg 的标记探针 。试剂盒提供全部四种 dNTP， 可根据需要灵活选择标记。通过标记对照 DNA， 来检测实验体系。
 使用 NEBlot 试剂盒标记 25 ng 经过 HindIII 消化的 λ DNA， 比活性高于 1X 109 dpm/μg。
 

试剂盒组成

■   8 碱基随机引物， 溶于 10X 标记缓冲液中
■   Klenow 片段 (无 3' →5' 核酸外切酶活性)  (5  units/μl) 
■   对照 DNA (经 HindIII 消化的 λDNA，25 ng/μ
■   dNTPs (0.5 mM 溶于 Tris-HCl pH 7.0) 
■   无核酸酶的水

原厂资料：