GoTaq® Hot Start Green Master Mix, 2X【子货号:M512C,包装:1 x 25ml,,运保温度:-20℃】
Nuclease-Free Water【子货号:P119C,包装:1 x 25ml,,运保温度:-20℃】
描述:
说明
GoTaq® Hot Start Polymerase (GoTaq® 热启动DNA 聚合酶)内含高性能的GoTaq® DNA 聚合酶,并具有专利抗体与之结合从而阻断其活性。在最初的变性步骤中,当扩增反应体系被加热到94-95℃ 2 分钟时,聚合酶活性得到恢复。聚合酶活性在低于70℃时消失或活性最低,实现热启动PCR。GoTaq® 热启动DNA 聚合酶具有5` → 3` 核酸外切酶的活性。随同酶一起提供一管25mM MgCl2,可以优化反应体系中镁离子浓度。同时也提供5X Green GoTaq® FlexiBuffer 和5X Colorless GoTaq® Flexi Buffer。这些缓冲液中含有一种能增加样品密度的化合物,使得样品很容易沉进琼脂糖胶加样孔中。绿色缓冲液含有两种染料( 蓝色和黄色),在电泳时会分开以监测迁移进度。用绿色缓冲液可在扩增后直接进行电泳分析,而无色的缓冲液用于染料可能会干扰扩增后分析的情形,如荧光或吸光度分析。GoTaq®Hot Start Master Mixes (GoTaq®热启动混合母液) 是预混的、即用的溶液,包含高性能的GoTaq® Hot Start Polymerase(GoTaq®热启动聚合酶)、镁离子溶液、dNTP 和缓冲液。在室温下,不到1分钟的时间里即可被组装、启动;您只需加入模板、水和引物。我们提供绿色或无色的反应缓冲液,也可作为上样缓冲液,可让您实现将PCR 产物从PCR 仪中取出,直接进行凝胶分析。GoTaq® Hot Start Master Mixes 中的热启动聚合酶是基于抗体的,可提供更好的特异性和灵敏度,并且方便、易于使用,并节省时间。
GoTaq® Hot Start Green Master Mix是预先混合的、即用型溶液,含有GoTaq® 热启动酶、dNTPs、MgCl2和反应缓冲液,这些组分均为最佳浓度,用以通过PCR反应对DNA模板进行有效扩增。GoTaq® 热启动酶内含高性能的GoTaq® DNA聚合酶,还含有专利抗体与之结合从而阻断聚合酶的活性。在初始变性步骤中,当扩增体系在94-95℃被加热2分钟时,聚合酶活性得到恢复。由于聚合酶活性在低于70℃时被抑制,这使得在室温组建反应的热启动PCR可以实现。因为热启动PCR可以消除或最大限度地减少引物二聚体和二级产物,所以在扩增一些靶标时非常有利。在有些情况下,热启动PCR还可以提高产率。GoTaq® Hot Start Green Master Mix 含有两种染料(蓝色和黄色),在电泳时分离,便于监测电泳的进程。使用GoTaq® Hot Start Master Mix 组装的反应具有足够的密度,可以直接加样到琼脂糖凝胶上。GoTaq® 热启动酶具有5’-3’核酸外切酶活性。
如果PCR扩增反应后用琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色来分析,那么推荐使用GoTaq® Hot Start Green Master Mix。如果扩增后下游应用需检测吸光值或者进行荧光激发,那么不推荐使用GoTaq® Hot Start Green Master Mix,因为预混液中的染料可能会干扰这些应用。GoTaq® Hot Start Green Master Mix中的染料在225-300nm有吸收,使测定DNA浓度的A260读数不可靠。这些染料在488nm以及600-700nm之间有激发峰,与荧光检测仪器中常用的激发波长有重合。然而,对一些仪器(如:使用488nm激发波长的的荧光胶扫描仪)来说,这种干扰极小。原因是:在488nm波长有吸收的是黄色染料,而黄色染料比引物(<50bp)迁移得快。胶经扫描后会在引物下面有浅灰的染料前沿(与黄色染料前沿对应)。
GoTaq® Hot Start Green Master Mix, 2X: 含有GoTaq® 热启动酶、2X绿色GoTaq® 反应缓冲液 (pH 8.5)、400μM dATP、 400μM dGTP、400μM dCTP、 400μM dTTP和 4mM MgCl2。绿色GoTaq® 反应缓冲液使用专利的配方,其中含有能够增加样品密度的化合物以及黄色和蓝色的染料(当用琼脂糖凝胶电泳分析反应产物时可作为上样染料)。在1% 的琼脂糖凝胶中,蓝色染料与3–5kb DNA 片段的迁移速度相同。黄色染料比引物(<50bp)迁移得快。
特点
• 增加产量,灵敏度和特异性:GoTaq® DNA 聚合酶扩增的强劲性能和高灵敏度已经得到证实,热启动的加入产生更优异的结果。
GoTaq® Long PCR Master Mix contains the high-performance GoTaq® Hot Start Polymerase in a specially formulated mixture with a proprietary thermostable proofreading polymerase. This optimized enzyme mixture allows efficient amplification of up to 40kb from lambda DNA or 30kb from human genomic DNA. The presence of a proofreading enzyme to repair DNA mismatches and a highly processive polymerase allows the polymerase to continue to elongate the DNA much further, resulting in longer DNA amplification.
The optimized formulation of the GoTaq® Long PCR Master Mix components enables simple reaction setup and provides consistently efficient, accurate and robust amplification of long DNA amplicons.
Features - Benefits
The proven robust amplification using GoTaq® Polymerase is now available for long-range PCR (up to 30kb gDNA).
Easy: Hot-start master mix for convenient handling and simple setup.
Enhanced: Yield, sensitivity and specificity with optimized components.
Accurate: Blend of thermostable DNA polymerases with enhanced processivity and proofreading.
Confident: Control primer pair and human gDNA template to perform control reactions and test template quality.
Efficient: Perfect for cloning genes, mutational analysis and DNA sequencing.
Guarantee
PCR Satisfaction Guarantee
Promega's PCR Systems, enzymes and reagents are proven in PCR to ensure reliable, high performance results. Your success is important to us. Our products are backed by a worldwide team of Technical Support scientists. Please contact them for applications or technical assistance. If you are not completely satisfied with any Promega PCR product we will send a replacement or refund your account. That's Our PCR Guarantee!
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