Quick Ligation Kit

产品编号：M2200V 品牌：New England Biolabs 原厂货号：M2200V
产品分类：克隆 > 限制性内切酶和连接酶 > 连接酶
应用分类：

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-20°C

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1.含干冰类产品有运费；

2. 必须现金付款或有信用额度的会员才可以直接发货，否则需要等待现金付款信息。

描述：

特性

■ 粘性或平齐末端连接仅需 5 分钟

■ 连接反应在室温即可进行

快速末端平齐化试剂盒和快速连接试剂盒使您的克隆反应效率更高，同时购买节省15% 的开支。

概述

本试剂盒可在室温（25℃）5 分钟条件下，完成 DNA 片段粘性末端或平滑末端的连接反应。

试剂盒成份

■ 快速 T4 DNA 连接酶（重组酶）

■ 2X 快速连接缓冲液

2X 快速连接反应缓冲液

132 mM Tris-HCl
20 mM MgCl2
2 mM DTT
2 mM ATP
15% 聚乙二醇（PEG 6000）
pH 7.6 @ 25 ℃

质保声明

按照以下步骤检测快速连接试剂盒连接产物的转化效率：

LITMUS 28 载体经 EcoRV 切割（平齐末端）或 HindIII 切割（粘性末端）后，用小牛肠碱性磷酸酶（CIP）处理，胶回收纯化。插入片段来自 φX174 DNA 的 HaeIII 消化产物（平齐末端）或 λDNA 的 HindIII 消化产物（粘性末端），插入片段和载体以 3：1 的比例，按照快速连接程序进行连接。所得连接产物直接进行转化实验。

每一批试剂盒均高于以下标准：
               转化率（转化子/μg）
               重新环化数             插入数
粘性末端   > 5 x 106            > 1 x 106
平齐末端   > 2 x 106           > 1 x 106
未切载体      2 x 107

注意事项：

注意事项

使用前完全混匀。避免反复冻融。

用快速连接试剂盒能使大多数连接反应在 25 ℃ 条件下 5 分钟甚至更短的时间内达到反应终点，超过这个时间效果并不会更好。事实上，连接两小时后转化效率便会降低，如果 25 ℃ 反应过夜，则转化效率会降至 75%。

电转化可以使转化效率提高几个数量级。在用快速连接反应产物做电转化以前，一定要降低 PEG浓度。我们推荐使用柱离心式 DNA 纯化方法。