Vaccinia Capping System

• 产品编号：M2080S      品牌：New England Biolabs       原厂货号：M2080S
• 产品分类：蛋白质检测与分析 > 蛋白质，多肽和酶 > 其它纯化的蛋白及酶
• 应用分类：

描述：

特性

■   体内、外翻译前加帽 mRNA
■   5' 末端 mRNA 的标记

概述

牛痘病毒加帽体系基于牛痘病毒加帽酶，能提供必要原件,将 7-甲基鸟苷帽结构 (Cap 0) 加到 RNA 的 5' 末端。在真核生物中，该类末端帽结构影响到 mRNA 的稳定性、转运和翻译。带帽 RNA 的酶促反应是一种简单有效的方法，对用于体外转录、转染和显微注射的 RNA，能改善其稳定性和翻译能力。另外，反应中所用到的标记 GTP 还能提供一种便捷的标记方法，将 5' 末端带有三磷酸的任何 RNA 进行标记。

牛痘病毒加帽酶由两个亚基 (D1 和 D12) 组成，具有三种酶活性 (D1 亚基具有 RNA 三磷酸酶和尿苷转移酶活性；D12 亚基具有鸟嘌呤甲基转移酶活性) ，所有这些活性都是添加一个完整的 Cap 0 结构，即 m7Gppp(5' )N 所必需的。体外转录产物在有加帽酶、反应缓冲液、GTP 和甲基供体 SAM  的体系中，不到一个小时就可以完成加帽反应。加帽反应不仅高效而且方向正确，不像共转录会添加上一些帽类似物。

来源

携带牛痘病毒 (WR) 加帽酶基因的 E. coli 菌株。

反应条件

1X 加帽反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl (pH 8.0 @ 25℃) ，5 mM KCl，1 mM DTT，1 mM MgCl2]，37℃ 温育。

提供的试剂

牛痘病毒加帽酶
加帽缓冲液 (10X)
GTP 溶液 (10 mM)
SAM 溶液 (32 mM)

质保声明

无单链或双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶和 RNase 污染。

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下，1 小时内将 10 pmol (α-32P) GTP 结合到一条 80 个核苷酸的转录产物上所需要的酶量。

浓度

10,000 units/ml。

原厂资料：