RecA 蛋白在基因重组中是不可缺少的,它参与 DNA 修复和紫外线诱导的突变。RecA 促进 lexA 抑制子、umuD 蛋白和 lambda 抑制子的自裂解。切割 LexA 能使 20 多种基因不再受到抑制(1) 。体外研究证明:在 ATP 参与下,RecA 促进单链 DNA 片断与同源双链 DNA 片断发生链置换。上述反应需要三步来完成:(i) RecA 与单链 DNA 结合;(ii)核蛋白丝结合到双链 DNA 上寻找同源部分;(iii) 链置换(2) 。
来源
RecA 重组蛋白 N 端带有一个6 X His tag,重组蛋白来源于 E.coli 菌株 ER3010 中的质粒,其编码全长 353 氨基酸野生型 E. coli RecA 蛋白 。
应用
电镜分析 DNA 结构(3)
D 环突变(4)
用RecA 蛋白包被的探针来进行文库筛选(5,6)
切割任意一个预先设计的位点(7,8,9)
RecA 介导全长 cDNA 克隆的亲合捕获(10,11)