Bsu DNA Polymerase, Large Fragment

• 产品编号：M0330L      品牌：New England Biolabs       原厂货号：M0330L
• 产品分类：克隆 > 聚合酶 > DNA聚合酶
• 应用分类：

描述：

特性

 ■  随机引物法标记
 ■  合成 cDNA 第二链
 ■  加单个 dA 尾
 ■  链置换的 DNA 合成

概述

Bsu DNA 聚合酶大片段保留了 Bacillus subtilis DNA 聚合酶 I 的 5' →3' 聚合酶活性，但是缺失了 5' →3' 外切酶结构域。大片段缺乏 3' →5' 外切酶活性。

来源

重组的 E. coli 菌株，携带有 Bacillus subtilis DNA 聚合酶 I 基因 (起始于第 297 个密码子，因而缺失了 5' →3' 外切酶结构域) 和麦芽糖结合蛋白(MBP) 基因，两个基因融合表达，提纯融合蛋白后，在体外切除 MBP 部分。剩下的 DNA 聚合酶经纯化后不含 MBP。

反应缓冲液

1X NEBuffer 2
[10 mM Tris-HCl，50 mM NaCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ]。加入 33 µM dNTPs (不随酶提供) 。

单位定义

1 单位指 37 ℃ 条件下，30 分钟内使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。

浓度

5,000 units/ml。

热失活

75 ℃ 20 分钟。

原厂资料：

特性

 ■  随机引物法标记
 ■  合成 cDNA 第二链
 ■  加单个 dA 尾
 ■  链置换的 DNA 合成

概述

Bsu DNA 聚合酶大片段保留了 Bacillus subtilis DNA 聚合酶 I 的 5' →3' 聚合酶活性，但是缺失了 5' →3' 外切酶结构域。大片段缺乏 3' →5' 外切酶活性。

来源

重组的 E. coli 菌株，携带有 Bacillus subtilis DNA 聚合酶 I 基因 (起始于第 297 个密码子，因而缺失了 5' →3' 外切酶结构域) 和麦芽糖结合蛋白(MBP) 基因，两个基因融合表达，提纯融合蛋白后，在体外切除 MBP 部分。剩下的 DNA 聚合酶经纯化后不含 MBP。

反应缓冲液

1X NEBuffer 2
[10 mM Tris-HCl，50 mM NaCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ]。加入 33 µM dNTPs (不随酶提供) 。

单位定义

1 单位指 37 ℃ 条件下，30 分钟内使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。

浓度

5,000 units/ml。

热失活

75 ℃ 20 分钟。

注意事项：

由于缺乏 3' →5' 外切酶活性，Bsu DNA 聚合酶大片段不能切除 3' 未配对的突出末端，因而不适用于生成平滑末端。
25℃ 时 Bsu DNA 聚合酶大片段保留 50% 的活性，是同温度下 Klenow 片段 (3' →5' exo-) 的两倍。