Endonuclease V

产品编号：M0305L 品牌：New England Biolabs 原厂货号：M0305L
产品分类：克隆 > DNA/RNA修饰酶 > 核酸酶
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描述：

特性

■ 切割错配
■ 切割含脱氧次黄嘌呤核苷的寡核苷酸，对含错配碱基的寡核苷酸亲和力较弱

概述

核酸内切酶V 是在 E. coli 中发现的一种 DNA 修复酶。它识别 DNA 中的脱氧次黄嘌呤核苷，即脱氧腺苷的去氨基产物。核酸内切酶 V，也称为脱氧次黄嘌呤核苷 3' 内切酶，识别含脱氧次黄嘌呤核苷 (无论配对与否) 的双链或单链DNA 。也可识别含脱碱基 (AP) 位点或尿素、碱基错配、插入/缺失错配、发夹结构、未配对 loop 环、折叠 flaps 和类 -Y 型结构的 DNA ，但是识别后者的能力不如前者。普遍认为核酸内切酶 V 发挥 DNA 修复功能时，还需另外一种蛋白的存在，因为它不能切除 DNA 上的脱氧次黄苷或受损碱基。

核酸内切酶 V 对错配脱氧次黄嘌呤核苷 3' 端第二个或第三个磷酸二酯键进行切割，切割第二个磷酸二酯键的效率是 95%，第三个磷酸二酯键的效率是 5%，产生一个 3' 羟基、5' 磷酸的切刻。

来源

重组 E. coli 菌株，克隆有 Endo V 基因和编码麦芽糖结合蛋白（MBP）的基因的融合。融合蛋白纯化后具有生物活性。该蛋白含 223 个氨基酸，分子量为 24.9 kDa。

反应条件

1X NEBuffer 4 [50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2 , 1 mM DTT （pH 7.9）]。37℃ 温育。

质保声明

核酸内切酶 V 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下 1 小时内，能够切割 1 pmol 含单脱氧次黄嘌呤核苷位点*的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。

*脱氧次黄嘌呤核苷位点的制备：合成 34 bp 寡核苷酸双链时，在其一条链的中间掺入脱氧次黄嘌呤核苷（dI）碱基。

稀释兼容性

稀释液 C。

浓度

10,000 units/ml。

热失活

65 ℃ 20 分钟