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描述:
特性
■ 识别错配 DNA
■ 分解四方向交叉 DNA 或分支 DNA
■ 检测或切割异源二聚体 DNA 和切刻 DNA
■ 随机切割线性 DNA 进行 shot-gun 克隆
概述
T7 核酸内切酶 I 识别并切割不完全配对DNA、十字型结构 DNA、Holliday 结构或交叉 DNA、异源双链 DNA 或者以更慢的速度切割含切刻的双链 DNA。该酶切割错配碱基 5' 端的第一、第二或第三个磷酸二 酯键。
来源
C-端带有硫酯键的截短型无活性的 T7 核酸内切酶 I (tT7 Endo I) 与麦芽糖结合蛋白 (MBP) 融合表达。将合成的多肽 (由截短型的 T7 核酸内切酶 I 缺失的氨基酸序列构成) 与上述携带硫脂键的 tT7 Endo I 在体外进行连接反应,得到全长且有活性的 T7 核酸内切酶 I。
反应条件
1X NEBuffer 2 [50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2 ,1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ],37℃ 温育。
质保声明
T7 核酸内切酶 I 经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度
单位定义
1 单位指在 50 μl 反应体系,37℃ 条件下,1小时将 90% 以上的 1 μg 超螺旋十字型结构的 pUC (AT) * 转化成 90% 以上的线性结构所需要的酶量。 * pUC (AT) 来自 pUC19,在其 EcoRI 和 PstI 位点之间的多克隆位点处有修改。
浓度
10,000 units/ml。
热失活
无。
原厂资料:
注意事项:
T7 核酸内切酶 I 是一种具有底物结构选择性的酶。该酶以不同的活性作用于不同的 DNA 底物。切割特定底物时,必须控制酶量和反应时间。
反应温度超过 42 ℃ 时,会增加非特异性核酸酶活性。
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说明书
参考文献
本产品可用于的实验
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