Cre Recombinase

• 产品编号：M0298L      品牌：New England Biolabs       原厂货号：M0298L
• 产品分类：克隆 > DNA/RNA修饰酶 > 其他酶及抑制剂
• 应用分类：

描述：

特性

■  两个 loxP 位点之间 DNA 的切割

■  含 loxP 位点 DNA 分子的融合

■  loxP 位点之间 DNA 序列的翻转

概述

Cre 重组酶是细菌噬菌体 P1 的 I 型拓扑异构酶，催化 loxP 位点间的 DNA 进行位点特异性重组 (1) 。本酶无需能量辅助因子，Cre 介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡 (2) 。loxP 识别元件是一个 34bp 序列，其两端是两个 13bp 的反向重复序列，中间是起定向作用的 8 bp 间隔区 (3) 。重组产物根据 loxP 位点的位置和相对方向而不同，两个含单 loxP 位点的 DNA 将被融合。两个正向重复 loxP 位点间的 DNA 将以环状形式切割，而两个反向 loxP 位点间的 DNA 序列将被翻转。

来源

纯化自重组 E.coli 菌株，其中携带有编码细菌噬菌体 P1 的 Cre 重组酶的质粒，酶的 N 端添加了丙氨酸和甘氨酸残基 (4) 。

反应条件

1X Cre 重组酶反应缓冲液
[33 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2]，37°C 温育。

单位定义

1 单位指在 50 μl 反应体系，37°C 条件下，30 分钟使 0.25 μg 的 pLox2+ 对照 DNA  产生最大位点特异性重组所需要的酶量。最大重组可以通过琼脂糖凝胶电泳分析或通过反应物转化后行氨苄抗性平板筛选。

浓度

1,000 units/ml。

热失活

70°C 10 分钟。

原厂资料：