Exonuclease T

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描述：

特性

■ 特异地作用于单链 DNA 或 RNA
■ 使 DNA 或 RNA 的 3' 突出端变为平齐末端

概述

核酸外切酶 T (Exo T) 又称核糖核酸酶 T (RNase T) ，沿 3' →5' 方向特异性作用于单链 RNA 或 DNA 的 3' 突出末端。核酸外切酶 T 作用于 3' 突出末端，产生 RNA 或 DNA 分子的平末端。

来源

核酸外切酶 T 与麦芽糖结合蛋白 (MBP) C 端融合表达并纯化。经亲和层析纯化后，核酸外切酶 T 从 MBP 切下，N 端多出一个氨基酸，且原来的蛋氨酸由苯丙氨酸代替 (即 Glu-Phe-核酸外切酶 T，替换了原来的 Met-核酸外切酶 T) 。

反应条件

1X NEBuffer 4 [50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg(Ac)2，1 mM DTT (pH 7.9) ]，25℃ 温育。

质保声明

核酸外切酶 T 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

单位定义

1 单位指在 100 μl 反应体系中，25℃ 条件下，30 分钟内能从 1 nmol [3H]-标记的聚胸腺嘧啶核苷催化产生 0.1 nmol 的可溶于 TCA 的 DNA 所需要的酶量。

浓度

5,000 units/ml。

热失活

65°C 20分钟。

注意事项：

核酸外切酶 T 对 RNA 和 DNA 具有不同的活性。对于 RNA，在标准反应条件下，通过凝胶电泳检测，1 单位核酸外切酶 T 可以完全消化 1.0 pmol 的 rA20。