T7 RNA Polymerase

• 产品编号：M0251L      品牌：New England Biolabs       原厂货号：M0251L
• 产品分类：克隆 > 聚合酶 > RNA聚合酶
• 应用分类：

描述：

特性:

■  制备放射标记 RNA 探针

■  合成 RNA，用于体外翻译

■  合成 RNA，用于 RNA 结构、RNA 加工和催化性能的研究

■  合成 RNA 反义链，调控基因表达

概述:

T7 和 SP6 RNA 聚合酶分别对 T7 和 SP6 噬菌体启动子具有高度的特异性。已开发出多种载体，可将目的基因序列克隆到T7 和SP6 启动子下游的多克隆位点中，以此克隆的DNA 为模板体外合成相应的RNA。用 T7 和 SP6 RNA 聚合酶合成的 RNA 具有 mRNA 的生物特性，可进行准确剪切。实验证实，将克隆的 DNA 插入序列反向而产生的 RNA 反义链能特异性地阻断体内 mRNA 的翻译。由于 RNA/DNA 杂交体比 RNA/RNA 和 DNA/DNA 杂交体更稳定，因此核酸杂交反应中的检测信号会更强。

来源:

SP6 RNA 聚合酶来自重组 E. coli 菌株，该菌株含有克隆于 Salmonella typhimurium LT2Z 的 SP6 RNA 聚合酶基因。T7 RNA 聚合酶来自重组 E.coli BL21 菌株，该菌株含有可表达 T7 基因 I 的 pAR1219 载体，这一基因受到可诱导的 lac UV5 启动子控制。

反应条件:

1 X  RNAPol 反应缓冲液[40 mM Tris-HCl (pH 7.9) ，6 mM MgCl2，2 mM spermidine，10 mM DTT］。反应时需加入各 0.5 mM 的 ATP，UTP，GTP，CTP (不随酶提供)， 和带有启动子的模板 DNA，分别在 37℃ (T7 RNA 聚合酶) 或 40℃ (SP6 RNA 聚合酶) 下温育。

质量保证:

无 RNA 聚合酶、DNA 和 RNA 核酸酶污染。

单位定义:

1 单位指在 37 ℃（T7 RNA 聚合酶）或 40 ℃条件下（SP6 RNA 聚合酶），30 分钟内使 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。

浓度:

T7 RNA 聚合酶：50,000 units/ml；SP6 RNA 聚合酶：20,000 units/ml。

原厂资料：

特性:

■  制备放射标记 RNA 探针

■  合成 RNA，用于体外翻译

■  合成 RNA，用于 RNA 结构、RNA 加工和催化性能的研究

■  合成 RNA 反义链，调控基因表达

概述:

T7 和 SP6 RNA 聚合酶分别对 T7 和 SP6 噬菌体启动子具有高度的特异性。已开发出多种载体，可将目的基因序列克隆到T7 和SP6 启动子下游的多克隆位点中，以此克隆的DNA 为模板体外合成相应的RNA。用 T7 和 SP6 RNA 聚合酶合成的 RNA 具有 mRNA 的生物特性，可进行准确剪切。实验证实，将克隆的 DNA 插入序列反向而产生的 RNA 反义链能特异性地阻断体内 mRNA 的翻译。由于 RNA/DNA 杂交体比 RNA/RNA 和 DNA/DNA 杂交体更稳定，因此核酸杂交反应中的检测信号会更强。

来源:

SP6 RNA 聚合酶来自重组 E. coli 菌株，该菌株含有克隆于 Salmonella typhimurium LT2Z 的 SP6 RNA 聚合酶基因。T7 RNA 聚合酶来自重组 E.coli BL21 菌株，该菌株含有可表达 T7 基因 I 的 pAR1219 载体，这一基因受到可诱导的 lac UV5 启动子控制。

反应条件:

1 X  RNAPol 反应缓冲液[40 mM Tris-HCl (pH 7.9) ，6 mM MgCl2，2 mM spermidine，10 mM DTT］。反应时需加入各 0.5 mM 的 ATP，UTP，GTP，CTP (不随酶提供)， 和带有启动子的模板 DNA，分别在 37℃ (T7 RNA 聚合酶) 或 40℃ (SP6 RNA 聚合酶) 下温育。

质量保证:

无 RNA 聚合酶、DNA 和 RNA 核酸酶污染。

单位定义:

1 单位指在 37 ℃（T7 RNA 聚合酶）或 40 ℃条件下（SP6 RNA 聚合酶），30 分钟内使 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。

浓度:

T7 RNA 聚合酶：50,000 units/ml；SP6 RNA 聚合酶：20,000 units/ml。