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描述:
特性:
■ 可在高温条件下,连接 DNA 链上的切刻位点 ■ 具有极高的耐热性,与 PCR 反应条件兼容 ■ 可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测 ■ 可通过 PCR 扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变
概述:9oNTM DNA连接酶能够催化磷酸二酯键的形成,使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的 5' -磷酸末端和 3' -羟基末端通过磷酸二酯键相连。该酶在 45 ℃-90 ℃ 范围内均有活性。
来源:纯化自重组 E. coli 菌株,其携带有从极度耐热的海底超嗜热古菌(Thermococcus sp.)9oN 菌株中克隆的连接酶基因。
反应条件:1X 9oN DNA 连接酶反应缓冲液 [10 mM Tris-HCl,600 μM ATP,2.5 mM MgCl2,2.5 mM DTT,0.1% Triton X -100 (pH 7.5 @ 25℃) ]。
1X 9oN DNA 连接酶反应缓冲液中,底物 DNA 和酶于 45℃ 温育 15 分钟,或者设定合适的反应条件使用热循环仪进行反应。连接反应通过加入含 50%甘油,50 mM EDTA 和溴酚蓝的混合物来终止。
质保声明:9oN DNA 连接酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义(粘性末端活性单位):
1 单位指 50 ul 反应体系中,45°C 条件下,15 分钟能使 50% 的 1 ug BstEII 消化的 λ DNA 片段(12 bp 粘性末端)发生连接所需要的酶量。
粘性末端活性单位相当于切口封闭单位。
浓度:40,000 units/ml。
热失活:无。
原厂资料:
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说明书
参考文献
本产品可用于的实验
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