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Dnmt1

 
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描述:

概述:Dnmt1 在半甲基化 DNA 的 5'…CG…3' 位点甲基化胞嘧啶残基(1,2)。现认为哺乳动物 Dnmt1 与癌症发生、胚胎发育和几种其它生物功能有关(3-5)。在细胞循环 S 期的 DNA 复制阶段发生大量的甲基化(6)。

来源:用杆状病毒表达系统表达人 Dnmt1 cDNA(1,7) 。

反应条件:1X Dnmt1 反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl (pH 7.8) ,1 mM EDTA,1 mM DTT,5% 甘油],加入100 μg/ml BSA 和 160 μM SAM。于 37℃ 温育。

随酶提供的试剂:10X Dnmt1 反应缓冲液
100X BSA
32 mM S-腺苷甲硫氨酸(SAM)

质保声明:无核酸内、外切酶污染。

单位定义:1单位指在25 μl反应体系中,37°C条件下30分钟催化1 pmol的甲基基团转移到聚dl.dC底物上所需要的酶量。

浓度:2,000 units/ml

热失活:65℃, 20分钟

 


注意事项:

建议选用M.SssI(NEB #M0226)修饰和保护 DNA,因该酶能同时有效地对未甲基化和半甲基化的底物DNA 进行甲基化。


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参考文献

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