HEN1 miRNA Methyltransferase

产品编号：M0228L 品牌：New England Biolabs 原厂货号：M0228L
产品分类：克隆 > DNA/RNA修饰酶 > 甲基化转移酶
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描述：

特性：♦ siRNA 和 miRNA/miRNA*的 3'末端标记。

概述：HEN1 是植物 miRNA 甲基转移酶，可甲基化双链短 RNA 核糖末端。拟南芥中，miRNA 和 siRNA 的 3' 核糖 2' -0-甲基化就是由 HEN1 介导的。在HEN1 突变体中，没有甲基化的 3' 末端有 poly (U) 尾，预示 3' 末端的甲基化可以保护小 RNA 免于尿苷化。纯化的 HEN1 既可甲基化 miRNA/miRNA 又可甲基化 siRNA 双链，特别是含有两个突出碱基的，21-24 个核苷酸的双链 RNA。HEN1 不能甲基化单链 RNA 或 DNA。

来源：携带克隆有拟南芥 HEN1 基因的 E coli 菌株。

反应条件：25 μl 体系：1X NEBuffer 2 [10 mM Tris-HCl，50mM NaCl，1mM DTT，10 mM MgCl2，(pH 7.9 @ 25℃) ]，128 μM S-腺苷甲硫氨酸和 500 ng miRNA 双链。37℃ 温育。

使用说明：在 25 μl 反应体系中可甲基化高达 500 ng 双链 miRNA 或 75 pmol 3' 末端。
SAM 使用前应用 H2O 以 1:10 的比例稀释。标记miRNA 时，可用 2 μl [14C] SAM 代替非同位素标记的SAM，欲提高标记比活性，可降低 miRNA 的量。

单位定义：1 单位是指在 37℃ 条件下，10 分钟能将 1 pmol 甲基基团转移到双链 miRNA 上所需的酶量。

浓度;50,000 units/ml。

热失活：70℃ 加热 10 分钟。