CpG Methyltransferase (M.SssI), high conc.

产品编号：M0226M 品牌：New England Biolabs 原厂货号：M0226M
产品分类：克隆 > DNA/RNA修饰酶 > 甲基化转移酶
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描述：

识别位点

■ 阻止限制性内切酶的切割
■ CpG 甲基化依赖性基因表达的研究
■ 研究特异序列与 DNA 大沟的相互作用
■ 改变 DNA 的物理特性
■ 对 DNA 统一进行 [3H] 标记
■ 减少限制性内切酶的酶切位点数目，提高限制性内切酶的特异性

概述：CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 能将双链二核苷酸识别序列 5' ...CG...3' 中所有胞嘧啶残基 (C5) 甲基化。

来源：分离自重组的 E. coli 菌株，该菌株克隆有桑皱褶螺原体 (Spiroplasma sp.) MQ1 菌株的 CpG 甲基转移酶基因。

反应条件：1X NEBuffer 2 + SAM [50 mM NaCl，10 mMTris-HCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT (pH 7.9 @ 25°C) ]。加入 160 μM S-腺苷甲硫氨酸 (SAM，随酶提供) 。37°C 温育。

注意：MgCl2 并不是必需的辅因子。Mg2+ 存在时，M.SssI 更倾向于分散甲基化，而不是连续甲基化，同时，会出现具有拓扑异构酶的活性。

质保声明：CpG 甲基转移酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

单位定义：1 个酶活单位定义为在 20 μl 反应体系中，37°C 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 BstUI 限制性内切酶切割所需要的酶量。

浓度;4,000 units/ml 和 20,000 units/ml (通过 λ DNA 检测) 。

热失活：65°C 20 分钟。

注意事项：

CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 可以特异性地模拟高等真核生物基因组的修饰模式，因而可用于研究高等真核生物体内胞嘧啶甲基化的功能。与哺乳动物甲基转移酶不同，CpG 甲基转移酶对未甲基化和半甲基化的 DNA 底物的甲基化效率相同，因此该酶是更为有效的 DNA 修饰工具。

只要限制性内切酶的识别位点含有 CG 序列或此二核苷酸的重叠序列，CpG 甲基转移酶均能有效地阻止其发挥切割活性。需要注意的是，CpG 甲基转移酶使 DNA 甲基化，而 E. coli 中的 Mcr 和 Mrr 的限制作用不受甲基化影响 (详见目录 315-317页) ，故应使用 Mcr-、Mrr- 的 E. coli 菌株 (例如，NEB #C2925) 作为转化的宿主菌。