概述:“Taq DNA 连接酶能够催化磷酸二酯键的形成,使杂交到同一互补靶 DNA 链上的两条契合寡核苷酸链的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端通过磷酸二酯键连接。这个连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。在 45℃-65℃ 范围内,Taq DNA 连接酶均有活性 (1,2) 。
来源:重组 E. coli 菌株,含有从 Thermus aquaticus HB8 中克隆的连接酶基因(1) 。
反应条件:
1X Taq DNA 连接酶反应缓冲液 [20 mM Tris-HCl(pH 7.6 @ 25 ℃),25 mM KAc,10 mM Mg(Ac)2,10 mM DTT,1 mM NAD 和 0.1% Triton X-100],45 ℃ 温育。