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T4 RNA Ligase 1 (ssRNA ligase)

 
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1.含干冰类产品有运费;

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描述:

特性;

■  连接单链 RNA 和 DNA
■  用 5'-[ 32P] pCp 标记 RNA 3'末端
■  RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接(3,4)
■  合成单链寡核糖核酸(5)
■  蛋白质中掺入非天然氨基酸(6)

 

概述:催化 3'→5' 磷酸二酯键的形成,使核苷酸的5' -磷酸末端和 3'-羟基末端连接。伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi 作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸(1)。

 

来源:携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E.coli 菌株。

 

反应条件:1X T4 RNA 连接酶缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃) ,10 mM MgCl2,1 mM DTT 1mM ATP],37℃ 温育。

 

随酶提供试剂:

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
10 mM ATP
50% PEG 8000

 

质保声明:无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶污染。

 

单位定义:1 单位指 37℃ 条件下,30 分钟内将 1 nmol 的 5' -[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。

 

浓度:10,000 units/ml。

 

热失活:65℃ 15 分钟或煮沸 2 分钟。

 

 


注意事项:

pCp 的连接需要加入终浓度为 10%(v/v)的 DMSO(2)。


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参考文献

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