T4 RNA Ligase 1 (ssRNA ligase)

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描述：

特性;

■ 连接单链 RNA 和 DNA
■ 用 5'-[ 32P] pCp 标记 RNA 3'末端
■ RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接（3,4）
■ 合成单链寡核糖核酸（5）
■ 蛋白质中掺入非天然氨基酸（6）

概述：催化 3'→5' 磷酸二酯键的形成，使核苷酸的5' -磷酸末端和 3'-羟基末端连接。伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi 作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸（1）。

来源：携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E.coli 菌株。

反应条件：1X T4 RNA 连接酶缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃) ，10 mM MgCl2，1 mM DTT 1mM ATP]，37℃ 温育。

随酶提供试剂：

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
10 mM ATP
50% PEG 8000

质保声明：无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶污染。

单位定义：1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内将 1 nmol 的 5' -[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。

浓度：10,000 units/ml。

热失活：65℃ 15 分钟或煮沸 2 分钟。

注意事项：

pCp 的连接需要加入终浓度为 10%（v/v）的 DMSO（2）。