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描述:
特性:■ 高保真 ■ 缺口填充 (无链置换活性) ■ 产生平末端的最佳用酶 ■ 补平 5' 突出端,形成平末端 ■ 切除 3' 突出末端,形成平末端 ■ 通过置换合成法标记探针 ■ 单链删除后亚克隆 ■ 基因定点突变中第二条链的合成
概述;在模板及引物存在的条件下,T4 DNA 聚合酶催化沿 5' →3' 方向合成 DNA。此酶还具有 3'→5' 外切核酸酶的活性,该活性比 DNA 聚合酶 I 强。与 E. coli DNA 聚合酶 I 不同,T4 DNA 聚合酶不具有 5' →3' 外切核酸酶活性。
来源:是从一种携带有高表达 T4 DNA 聚合酶质粒的大肠杆菌中提纯制备的。
反应条件:1X NEBuffer 2 [10 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,10 mM MgCl2,1 mMDTT (pH 7.9 @ 25℃) ]。加入 100 μg/ml BSA 和 dNTP(不随酶提供) 。 当添加 BSA 和 dNTP 后,T4 DNA 聚合酶在所有的NEB 限制性内切酶反应缓冲液和 T4 DNA 连接酶反应缓冲液中都有活性。
单位定义:1 单位指在 37℃ 条件下,30 分钟内使10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的 酶量。
浓度:3,000 units/ml。
热失活:75℃ 20 分钟。
原厂资料:
注意事项:
由于该酶具有 3' →5' 外切酶的活性,提高反应温度、增加酶量、没有加入 dNTP 或反应时间过长都可能造成 DNA 末端碱基被切除形成凹陷。
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说明书
参考文献
本产品可用于的实验
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