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描述:
PureLink™ HiPure FP(过滤器和沉淀器)质粒大量提取试剂盒 (PureLink™ HiPure Plasmid FP (Filter and Precipitator) Maxiprep Kit) 用于分离质粒 DNA,不到一小时即可从细胞团状物分离出超纯 DNA。 使用试剂盒中提供的 HiPure 过滤柱和 HiPure 沉淀器,不必像传统分离方案那样进行离心步骤即可纯化质粒 DNA。 纯化的质粒 DNA 的质量相当于进行了两次氯化铯梯度离心 - 最严格的 DNA 纯化方法,适用于需要高纯度质粒 DNA 的转染和其它应用。 PureLink™ HiPure FP 质粒大量提取试剂盒 (PureLink™ HiPure Plasmid FP Maxiprep Kit)(表 1)提供: • 简单的实验方案 - 无需离心即可进行细菌裂解液澄清和异丙醇沉淀 • 快速获得结果 - 从 E. coli 细胞团状物到高纯度、转染级质粒 DNA,只需约 60 分钟 • 高产量 - 可制备高达 850 µg 高拷贝质粒 工作原理 PureLink™ HiPure FP 质粒大量提取试剂盒 (PureLink™ HiPure Plasmid FP Maxiprep Kit) 采用碱裂解法来制备和快速澄清细菌裂解液,无需离心(图 1)。 独特的 HiPure 过滤柱包括整合到阴离子交换柱上的裂解液过滤器。在同一步骤中,既能澄清裂解液,又可以结合质粒 DNA。 单次洗涤即可去除 RNA、蛋白质和其它污染物等杂质,超纯质粒 DNA 用高盐缓冲液洗脱。 为使 DNA 沉淀及脱盐,将异丙醇添加至洗脱得到的 DNA 溶液中,然后使用大注射器将此混合溶液上样到 HiPure 沉淀器 (HiPure Precipitator) 中。 经过后续的洗涤和干燥步骤后,用 TE 缓冲液或水就可从 HiPure 沉淀器中轻松洗脱下质粒 DNA。 使用沉淀器避免了离心,进而防止了 DNA 团状物在上清转移过程中丢失,节省了时间。 所得 DNA 可直接用于最具挑战性的应用。 整个实验方案 - 从 E. coli 细胞团状物到超纯、转染级质粒 DNA - 可以在约一小时内完成。 最高产量和即用型浓度 查看更多HiPure 沉淀器经过优化,可用较低的洗脱体积(低至 500 µl)产生高浓度的 DNA,而不大幅降低产量。 实际上,DNA 的浓度及产量一直高于竞争对手的试剂盒(图 2)。 可以调整产量和浓度以满足下游应用的需要。 组成与储存: PureLink™ HiPure FP 质粒大量提取试剂盒 (PureLink™ HiPure Plasmid FP Maxiprep Kit) 包括平衡缓冲液、重悬缓冲液、裂解缓冲液、沉淀缓冲液、RNase A、洗脱缓冲液、TE 缓冲液、HiPure 过滤柱和 PureLink™ HiPure 沉淀器组件。 PureLink™ HiPure 沉淀器组件包括 HiPure 沉淀器以及 5 ml 和 30 ml 注射器。 室温下保存所有组分。
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参考文献
本产品可用于的实验
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