LIVEBLAZER FRET B/G LOADINGKIT 1 MG

产品编号：K1096 品牌：invitrogen 原厂货号：K1096
产品分类：生化和细胞分析 > 标签、标记试剂盒 > 酶底物 > β-内酰胺酶底物
应用分类：行业及应用 > 药物研发 > 靶标和先导药物鉴定及验证 > 激酶生物学 > 激酶通路分析 > 标记和检测产品 > 酶底物 > β-内酰胺酶
　　　　　行业及应用 > 药物研发 > 靶标和先导药物鉴定及验证 > G 蛋白偶联受体生物学G-Protein Coupled Receptor Biology (GPCR) > Cell-Based GPCR Reporter Assays > 标记和检测产品 > β-内酰胺酶
　　　　　行业及应用 > 药物研发 > 靶标和先导药物鉴定及验证 > G 蛋白偶联受体生物学G-Protein Coupled Receptor Biology (GPCR) > Membrane Protein Expression System > 基于细胞的核受体报告基因分析 > 底物 > 酶底物 > β-内酰胺酶

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其它组分：

CCF4-AM【子货号：K1089，包装：200 μg× 5】

DMSO for Solution A【子货号：K1040，包装：1 mL× 5】

Solution B(100 mg/mL Pluronic®-F127 surfactant in DMSO and 0.1% acetic acid)【子货号：K1041，包装：5 mL× 5】

Solution C(24% w/w PEG 400, 18% TR-40 by volume in water)【子货号：K1048，包装：32 mL× 5】

描述：

背景：
GeneBLAzer® 细胞分析利用带负电荷的荧光 β-内酰胺酶底物（CCF2 和 CCF4）的膜渗透酯形式。这些亲脂性酯易于进入细胞，细胞中的内源性细胞质酯酶将其裂解，使之快速转化成带负电荷的形式，从而将其捕获在细胞液中。

GeneBLAzer® 分析的检验是基于 FRET 的。用可形成高效 FRET 对的两个荧光基团标记每种底物。在没有 β-内酰胺酶活性的条件下，在 409 nm 激发完整 CCF2 分子中的香豆素会使荧光共振能量转移至荧光素，使荧光素发出 518 nm 的绿色荧光信号（图 1）。然而，如果存在 β-内酰胺酶活性，CCF2 的切割能从空间上将两种染料分开并干扰荧光共振能量转移 (FRET)，此时如果用 409 nm 的光激发香豆素，产生的将是 447 nm 的蓝色荧光信号。这种蓝色信号在显微镜下易于观察，也可通过荧光
酶标仪蓝色通道读数的增加进行检测。

CCF2-AM 和 CCF4-AM 底物是 GeneBLAzer® 平台必需的分析组分。这些底物与流式细胞仪完全兼容，可提高克隆选择的速度。蓝色和绿色信号的比值分析能降低由细胞数量和底物上样量不同引起的孔间差异，从而获得高 Z´ - 因子值和低变异系数 (CV)。

CCF2-AM 和 CCF4-AM 的差别在于香豆素基团和内酰胺环连接桥的两个碳。两者都是膜渗透和酯化形式，适用于完整细胞分析。 CCF4-AM 的溶解性比 CCF2-AM 好（>24 小时可溶解），因而最适合筛选应用。此外，CCF4-AM 的 FRET 优于 CCF2-AM，因此背景略低。

CCF2-FA 实际是 AM 中的 CCF2 底物除去酯。 CCF2-FA 经过去酯化，用于细胞裂解操作，可省去穿透细胞膜上样和去酯化的步骤。如果应用中使用的细胞包含细胞壁，则细胞裂解是首选方法。 CCF2-FA 也可用作对照，获得 CCF2-AM 和 CCF4-AM 的激发和发射光谱。

注意事项：

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.