pMAL Protein Fusion and Purification System

• 产品编号：E8200S      品牌：New England Biolabs       原厂货号：E8200S
• 产品分类：蛋白质表达与纯化 > 蛋白质表达系统 > 细菌表达系统
• 应用分类：

描述：

♦ 75% 的蛋白可获得高效表达，蛋白产量可达 100 mg/L

♦ 可在细胞质或周质中表达：周质表达可提高二硫键的形成，促进蛋白质折叠

♦ MBP 融合表达可以提高蛋白质在大肠杆菌中的可溶性表达

♦ 采用麦芽糖温和洗脱：无去污剂或变性剂对蛋白活性的影响

概述：pMAL™ 系统是一种高效的蛋白融合表达及纯化系统。pMAL 载体含有编码麦芽糖结合蛋白(maltose-binding protein, MBP) 的大肠杆菌 mal E 基因，其下游的多克隆位点便于目的基因插入，表达 N 端带有 MBP 的融合蛋白。通过“Ptac”强启动子和 mal E翻译起始信号使克隆基因获得高效表达，并利用MBP 对麦芽糖的特异性结合实现融合蛋白的一步亲和纯化 (图1) 。

此系统的 pMAL 载体在邻近多克隆位点处含有一段编码特异性蛋白酶识别位点的序列，从而便于纯化后将目的蛋白与 MBP 切割分离,并且目的蛋白不含任何来自载体的氨基酸残基。为了实现这一目的，多克隆位点中有一限制性内切酶识别位点正好位于特异性蛋白酶识别位点处，同时也是目的基因插入的位点。

pMAL 系列载体可从 1 升的培养液中表达出 100 mg的融合蛋白 (图2) 。大部分情况下，表达出的融合蛋白是可溶的，因为 MBP 已经被证实可提高大肠杆菌中表达蛋白的可溶性。尽管没有一种表达系统适用于所有基因克隆，但 pMAL 蛋白融合表达和纯化系统经证实：在被检测的已知蛋白中，有超过 75％ 能表达出稳定产量。

系统组成：

pMAL-c5X, pMAL-p5X
Amylose 树脂 (结合容量 ~40 mg/柱床体积)
Factor Xa 蛋白酶
 抗 MBP 抗血清 (用于 Western blot 分析)
 MBP5 (SDS-PAGE 电泳用 marker)
 MBP5-paramyosin-ΔSal (Factor Xa 切割对照蛋白)
NEB 表达用菌株 (E.coli ER2523)

原厂资料：