Ph.D.-7 Phage Display Peptide Library Kit

• 产品编号：E8100S      品牌：New England Biolabs       原厂货号：E8100S
• 产品分类：蛋白质检测与分析 > 蛋白质相互作用分析 > 噬菌体展示
• 应用分类：

描述：

Kit Components:
Ph.D.™-7 Phage Display Peptide Library
E. coli K12 ER2738
Biotin
Streptavidin, lyophilized
 

概述：噬菌体展示是一种体外筛选技术。它可以将一系列多肽或蛋白质文库展示在噬菌体颗粒的外部，而编码这些蛋白的 DNA 则位于病毒颗粒内部（1-3）。利用展示蛋白与其编码 DNA 之间的这种物理联系，我们可以通过一种简单的称为“生物淘选”的体外筛选方法（4），快速筛选出给定靶分子（抗体、酶、细胞表面受体等）的亲和配体。最简单的淘选方法是（见图1）：将展示不同多肽的噬菌体文库与固定在平板或小珠上的靶分子孵育，先洗去未结合的噬菌体，而后洗脱特异性结合的噬菌体。扩增洗脱下的噬菌体。重复上述结合洗脱过程，使展示了与靶分子结合的多肽序列的噬菌体分子富集。经过 3-4 轮筛选后，通过 DNA 测序或 ELISA 鉴定分子克隆。

NEB 提供 3 种随机肽库和供自制肽库所需的 M13KE克隆展示载体。这 3 种肽库包括 7 肽库（Ph.D.-7），12 肽库（Ph.D.-12）和受约束于二硫键的环 7 肽库（Ph.D.-C7C）。Ph.D.-C7C 随机肽库所展示的多肽两侧各加了一个半胱氨酸。噬菌体组装时经过氧化，形成环化的多肽。所有肽库的容量超过 20 亿个克隆。上述 3 种肽库表达的随机肽均在噬菌体次要包膜蛋白 pIII 的 N 端，故每一个病毒粒子可以表达 5 个拷贝。Ph.D.-7 和 Ph.D.-12 肽库表达的展示肽就是展示肽本身，不含有其它额外氨基酸，但是Ph.D.-C7C 表达的展示肽前含有 Ala-Cys。所有的肽库在展示肽和 pIII之间存在连接肽段（Gly-Gly-Gly-Ser）。

展示在噬菌体表面的随机肽库已被应用于多种领域，包括绘制抗原表位图谱(图2)、研究蛋白质与蛋白质相互作用及酶抑制剂，并且还用于发现 GroEL、HIV、半导体表面、小分子荧光团和药物的肽配基。通过对纯化的受体和完整细胞进行淘选，已经鉴定出了具生物活性的受体配基。通过体外淘选分离出来的具有细胞特异性的靶多肽，已成功地运用于该细胞基因的传递。应用本系统，也能鉴定霉菌孢子和细菌细胞的配基，如：在体内、外均可特异抑制炭疽霉素的多肽。此外，本系统还适用于体内淘选组织特异性多肽，将噬菌体注射到活体动物体内，采集相应的器官，然后再从中分离出具有组织特异性的噬菌体

原厂资料：