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描述:
特性:
■ 快速、简捷的 miRNA 检测方法
■ 可检测 pg 级别的样品,背景很低
■ 定量检测,三个 log 后仍为线性
■ p19 几丁质磁珠在 4 ℃下可保存 6个月
■ miRNA: RNA-探针杂交体的结合与miRNA 片段大小有关,与序列无关
概述:
p19 miRNA 检测试剂盒利用 p19 蛋白的强结合能力来检测与特异探针形成杂交体的 miRNA。p19 蛋白 (19 kDa) 来自于植物香石竹意大利环斑病毒 (CIRV) ,与小片段 dsRNA 有高度亲和性。该蛋白与 21 nt siRNA 更易结合,而不结合相同长度的 ssRNA 或 dsDNA。待 siRNA 或 miRNA:RNA 探针杂交体与 p19 结合后,可用磁性分离架 (NEB #S1506,#S1509,#S1511) 和 SDS 轻松分离,洗脱体积可以控制到很小。p19 磁珠还可将细胞质总 RNA 混合物中的 siRNA 水平富集 3,000 倍。 用 p19 进行 miRNA 检测有以下两个优点:一是结合效率高,二是与不同长度的 dsRNA 结合力不同。与特定 miRNA 互补且标记的 RNA 探针杂交,可获得 dsRNA 杂交体。该杂交体可与 p19 几丁质磁珠选择性结合,清洗未结合的探针,通过凝胶电泳计算或分析洗脱的双链 miRNA:RNA-探针。使用 32P 放射性 RNA 探针,可从百万倍未标记的 RNA 中检测到 10 pg 级的 miRNA。
p19 miRNA 检测试剂盒包括:
■ 结合有 p19 的几丁质磁珠悬浮液
■ p19 结合缓冲液和 BSA
■ 人源 RNAse 抑制剂
■ 清洗液和洗脱液
p19 Beads Capacity: 10 µl of p19 Beads suspension is enough to bind 300 ng of ds miRNA:RNA-probe. 1X p19 Binding Buffer: 20 mM Tris-HCl 100 mM NaCl 1 mM EDTA 1 mM TCEP 0.02% Tween-20 (pH 7.0 @ 25°C) 1X p19 Wash Buffer: 20 mM Tris-HCl 100 mM NaCl 1 mM EDTA (pH 7.0 at 25°C) supplement with 1X BSA (100 µg/ml) 1X p19 Elution Buffer: 20 mM Tris-HCl 100 mM NaCl 1 mM EDTA 0.5 % SDS (pH 7.0 at 25°C)
原厂资料:
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参考文献
本产品可用于的实验
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