Gel Shift Assay Core System

产品编号：E3050 品牌：promega 原厂货号：E3050
产品分类：DNA和RNA纯化 > 核酸分析 > EMSA
应用分类：

包装：

100 reactions

运保温度:

将HeLa 细胞核提取物储存于-70℃，其它组分储存于-20℃。

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其它组分：

AMV Reverse Transcriptase【子货号：AMV Reverse Transcriptase，包装：1 x 50u，，运保温度：-20℃】

T4 Polynucleotide Kinase【子货号：M410A，包装：1 x 100u，，运保温度：-20℃】

1.2kb Kanamycin Positive Control RNA【子货号：C154A，包装：1 x 100ng，，运保温度：-70℃】

T4 Polynucleotide Kinase 10X Buffer【子货号：Q561A T4 ，包装：1 x 100μl，，运保温度：-20℃】

Primer Extension 2X Buffer【子货号：E349B，包装：1 x 500μl，，运保温度：-20℃】

Loading Dye【子货号：E343B，包装：1 x 1ml，，运保温度：-20℃】

ΦX174 DNA/HinfI Dephosphorylated Markers【子货号：E351A，包装：1 x 500ng，，运保温度：-20℃】

Nuclease-Free Water【子货号：P119A，包装：1 x 1.25ml，，运保温度：-20℃】

Primer Extension Sodium Pyrophosphate【子货号：E350B，包装：1 x 75μl，，运保温度：-20℃】

Primer Extension Control Primer【子货号：E355A，包装：1 x 50pmol，，运保温度：-20℃】

描述：

凝胶迁移或电泳迁移率检测是一种用于检测DNA 结合蛋白的简单而快速的方法。这种方法被广泛用于序列特异DNA 结合蛋白的研究，如转录因子。该检测基于蛋白和DNA 的复合体在非变性聚丙烯酰氨凝胶中的迁移速率大大低于DNA 片段或双链寡核苷酸的迁移速率。凝胶迁移实验首先是将纯化蛋白或蛋白混合物( 如核或细胞提取物) 与³²P 末端标记的可能含有蛋白结合位点的DNA 片段共同孵育。然后用非变性聚丙烯酰氨凝胶分析反应产物。使用未标记的DNA 片段或含有目的蛋白结合位点的寡核苷酸或其它无关的DNA 序列进行竞争性实验，来确定DNA 结合蛋白假定结合位点的特异性。

Core System (Cat.# E3050，核心系统) 包含HeLa Nuclear Extract、SP1 和AP2 Consensus Oligos，可以作为阳性对照，是经过凝胶迁移实验检验的可靠系统。另外，核心系统还包含T4 多聚核苷酸激酶和Kinase 10X buffer 用于标记寡核苷酸，以及Gel ShiftBinding 5X Buffer。E3300 包含以上所有组分，此外，还包括AP1、OCT1、CREB、NF-kB 和 TFIID 结合的共有寡核苷酸。

. 阳性对照：核心系统包括HeLa 细胞核提取物及AP2 和SP1 共有寡核苷酸。

• 通用：寡核苷酸可以5` 末端标记，并用作蛋白特异探针或在竞争性实验中用作非标记的寡核苷酸。

原厂资料：

The gel shift, or electrophoretic mobility shift, assay provides a simple and rapid method for detecting DNA-binding proteins. Promega has developed the Gel Shift Assay System, which contains target oligonucleotides, a control extract containing DNA-binding proteins, binding buffer and reagents for phosphorylating oligonucleotides. The Gel Shift Assay Core System includes sufficient HeLa nuclear extract to perform 20 control reactions, Gel Shift Binding 5X Buffer, an SP1 Consensus Oligo and an AP2 Consensus Oligo. This is a reliable system for obtaining experience with gel shift assays because AP2 binding activity is stable and produces a strong gel shift.

注意事项：

将HeLa 细胞核提取物储存于-70℃，其它组分储存于-20℃。