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SignalSilence? PAK1 siRNA II

 
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描述:

PAK1 siRNA II将抑制人源和大鼠PAK1蛋白表达。Cell Signaling Technology (CST)公司的SignalSilence® PAK1 siRNA II允许研究者通过RNA干扰去特异性抑制PAK1蛋白表达,而RNA干扰是通过双链RNA分子传送到细胞中能选择性沉默基因表达的一个方法。所有来自CST公司的SignalSilence® siRNA产品都经过严格的内部检测,且显示通过免疫印迹分析方法减少靶蛋白表达。寡核苷酸的合成是通过三苯基分析(trityl analysis)一个碱基接着一个碱基被监测以确保合适的连接效率。随后通过亲和固相萃取纯化核苷酸。进一步,退火RNA双链通过质谱分析以确保这个双链确切组成。每一批通过质谱分析与前一批比较以确保最大的批间一致。CST公司推荐在细胞裂解前48到72小时转染100 nM PAK1 siRNA II。对于转染程序,按照转染试剂商提供的操作步骤。在使用中出现任何问题请随时联系CST公司。丝氨酸/苏氨酸激酶的p21-activated kinase (PAK)家族是从事于多种细胞内过程,包括细胞骨架的重排、MAPK信号、凋亡信号、吞噬细胞NADPH氧化酶的控制和生长因子诱导的轴突生长(1,2)。诱导PAK激活的数种机制已经被报道。Rac/Cdc42结合到PAK的氨基端CRIB (or PBD)结构域上引起PAK的自磷酸和构象的改变(1)。通过 PDK使PAK1在Thr423位点磷酸化诱导PAK1的激活(3)。数个自磷酸化位点已经被鉴定,包括PAK1的Ser199和Ser204位点以及PAK2的Ser192和Ser197位点(4,5)。因为自磷酸化位点位于氨基端抑制结构域,所以推测在这个区域内的修饰抑制该激酶恢复到失活构象(6)。研究指出PAK1的Ser144位点磷酸化或PAK3的Ser139位点(位于该激酶抑制区域)影响激酶活性(7)。PAK1的Ser21位点或PAK2的Ser20位点的磷酸化调节与接头蛋白Nck的结合(8)。PAK4、PAK5和PAK6与PAK1-3在氨基端调节域有低的相同序列(9)。PAK4的Ser474位点的磷酸化类似于PAK1的Thr423位点,它可能在调节PAK4的活性和功能起着重要作用(10)。

  1. Knaus, U.G. and Bokoch, G.M. (1998) Int. J. Biochem. Cell Biol. 30, 857-862.
  2. Daniels, R.H. et al. (1998) EMBO J. 17, 754-764.
  3. King, C.C. et al. (2000) J. Biol. Chem. 275, 41201-41209.
  4. Manser, E. et al. (1997) Mol. Cell. Biol. 17, 1129-1143.
  5. Gatti, A. et al. (1999) J. Biol. Chem. 274, 8022-8028.
  6. Lei, M. et al. (2000) Cell 102, 387-397.
  7. Chong, C. et al. (2001) J. Biol. Chem. 276, 17347-17353.
  8. Zhao, Z. et al. (2000) Mol. Cell. Biol. 20, 3906-3917.
  9. Abo, A. et al. (1998) EMBO J. 17, 6527-6540.
  10. Qu, J. et al. (2001) Mol. Cell. Biol. 21, 3523-3533.


注意事项:

Storage: PAK1 siRNA II is supplied in RNAse-free water. Aliquot
and store at -20°C.


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