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Click-iT®新生RNA捕获试剂盒,采用我们专利的Click-iT®化学技术可高效、高灵敏度地捕捉新生RNA。Click-iT方法可在进行基因调控的高分辨率分析的同时进行RNA调控、RNA稳定性、RNA合成、RNA衰变与降解、转录调控、delta⁄delta C、核run on⁄run off等许多分析。将含有一个炔烃反应基团的乙基尿嘧啶(EU)核糖核苷酸类似物导入细胞或者组织中。一旦掺入后,将细胞裂解、提取RNA。炔烃反应基团与生物素修饰的叠氮发生Click反应,随后用链霉亲和素磁珠来捕获新生成的RNA产物。捕获的RNA被扩增,其反转录生成的cDNA可用来做捕获后的各种分析研究。我们用它做了微阵(包括高密度和低密度的)、SOLiD™测序、SYBR® 或TaqMan®荧光定量PCR的delta CT等的验证。仅需1000个细胞的样品即可用于新生转录产物的分析。此试剂盒包含可完成40个标记与捕获所需的试剂量,其可用来做400个独立的分析检测。就总价位来看,本试剂盒特别适于学校与工业的研究者使用。 EU试剂,在推荐的200 µM浓度 ,可以被细胞很好地耐受。在对超过32,000基因进行的微阵分析中,我们能够只检测与对照组相对比的12个中最微小的变化。此外,在将EU的起始添加浓度增加为5倍推荐浓度后(200 µM 变成 1.0 mM),细胞的一组看家基因及正常增殖能力和均未受到影响。其灵敏度和可靠性经低密度凋亡基因微阵分析(TLDA®)确定。在捕获的新生产物中,准确的检测到了所有已被验证的细胞凋亡(叉抱素诱导的)转录产物,并且其序列信息与之前报道的结果无偏差。 *不是重复而是重新发现。* 在最近几十年的人类基因组研究中,仅有2%的人类编码基因获得解析,余下的98%人类基因组仍处于未知状态。在对如此庞大数目的未知序列的用途与表达模式进行研究时,这种新方法对近十年这种转录组学的研究将会有显著的帮助作用。 *研究RNA稳定性的能力。* 与其他方法相对比,本方法的最突出特点是在对mRNA的稳定性进行研究时无需使用放射性物质。在以前,传统的核run and run off实验中,有大约一半的转录本被放射性核苷酸所破坏。这种使用放射性物质的方法既繁琐又危险,越来越少地被采用。如今,通过新方法这些极其重要的评估可以简单、安全而又准确的获得。 *想知道什么是最新的?*与Click-iT系列的代谢类似物结合来标记新的材料!没有放射性或使用半抗原的困难。查找DNA、RNA、蛋白、糖类、翻译后修饰等更多的新内容。 *Click-iT®技术——一种反应,无限可能!*
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