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Annexin V Recom FITC 200Tst

 
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描述:

细胞凋亡是一种发生在胚胎发育过程以及在机体组织保持稳态的过程中的正常生理过程。凋亡程序包含某些形态学特征,包括细胞膜不对称性和附着、细胞质和细胞核的缩合以及DNA的内部断裂。细胞膜的损失是最早的特征之一。在凋亡细胞中,膜磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜的内部转移到外部小叶,从而暴露到细胞外部环境。膜联蛋白V是一个35-36 kDa的钙离子依赖性的磷脂结合的蛋白,对于PS的具有高亲和性,可通过暴露的PS结合到细胞上。膜联蛋白V可偶联荧光染料,包括FITC。该结合形式仍保留其对于PS的高亲和性,因而可作为一种敏感的探针,用于对正在处于凋亡过程的细胞进行FACS分析。由于PS的外翻发生在凋亡的早期阶段,故FITC膜联蛋白V染色相对于基于细胞核的变化的分析技术(例如DNA片段化分析),可在较早的阶段识别细胞凋亡。
用FITC膜联蛋白V方法染色时,通常将一种活体染料结合使用,例如碘化丙啶(PI)或7-氨基放线菌素(7-AAD),以允许研究者识别早期的凋亡细胞(PI阴性,FITC膜联蛋白V阳性)。活细胞具有完整的细胞膜,PI不能渗透进入细胞,而PI可透过死亡和损伤的细胞的细胞膜。例如,FITC膜联蛋白V和PI染色均为阴性,则认为是活细胞;FITC膜联蛋白V阳性和PI阴性时,认为细胞处于早期凋亡阶段;FITC膜联蛋白V和PI染色均为阳性时,可认为细胞处于晚期凋亡阶段或已经死亡。此方法不能区分经历凋亡过程的死细胞与经历死亡过程的死细胞,因为在这两种情况下,死细胞均可被FITC膜联蛋白V和PI染色。然而,检测细胞凋亡时,随着时间的推移,细胞可从FITC膜联蛋白V和PI阴性(活细胞状态,或检测不到凋亡)状态,演变为FITC膜联蛋白V阳性和PI阴性(早期凋亡,细胞膜仍然完整),最后到FITC膜联蛋白V和PI阳性(细胞凋亡终末期和死亡)。细胞经历这三个阶段的运动即表明凋亡。与此相反,单次观察显示细胞均为FITC膜联蛋白V和PI阳性时,仅可提供细胞消亡过程的较少的信息。


注意事项:

1. Since applications vary, each investigator should titrate the reagent to obtain optimal results.

2.Source of all serum proteins is from USDA inspected abattoirs located in the United States.

3.Caution: Sodium azide yields highly toxic hydrazoic acid under acidic conditions. Dilute azide compounds in running water before discarding to avoid accumulation of potentially explosive deposits in plumbing.

4.Store undiluted at 4°C and protected from prolonged exposure to light. Do not freeze.


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