pGEM?-T Vector System II

• 产品编号：A3610      品牌：promega       原厂货号：A3610
• 产品分类：克隆 > 克隆载体和克隆试剂盒 > 载体 > PCR克隆载体
• 应用分类：克隆及合成生物学 > TA克隆

其它组分：

描述：

pGEM^® -T 载体系统是克隆PCR 产物的方便系统。pGEM^®-T载体是通过EcoRV 酶切pGEM^®-5Zf(+) 载体，并在两个3`末端加入胸腺嘧啶构建的。pGEM<sup>®</sup>-T 载体插入位点3`-T 突出端可极大提高PCR 产物的连接效率，因为3`-T突出端可以防止载体的自身环化，并且为某些热稳定性聚合酶产生的PCR 产物提供匹配碱基。这些聚合酶常常以模板不依赖模式在扩增产物的3` 端加上一个脱氧腺苷酸聚合物。
pGEM^® -T 载体多克隆区T 突出端的两侧均有BstZI 酶切位点，使用BstZI 单酶消化即可释放插入片段。也可选用适当的双酶消化释放插入片段。pGEM^® -T载体系统II 除了pGEM^® -T 载体系统I 所有成分外，还包括JM109 感受态细胞。

特点:

快速连接：使用2X 快速连接缓冲液(2X Rapid Ligation Buffer)可以使连接反应在室温下1 小时内完成。

蓝/ 白筛选：载体包含有T7 和SP6 RNA 聚合酶启动子，分别位于β - 半乳糖苷酶的α - 肽编码区内多克隆位点的两侧。α - 肽的插入失活允许在指示培养基上用颜色直接筛选重组克隆。

f1 复制起始位点：可用于制备单链DNA。

原厂资料：

pGEM®-T和pGEM®-T Easy 载体系统可用于PCR产物的克隆。这两种载体是通过 EcoRⅤ酶切pGEM®-5Zf(+)和pGEM® -T Easy载体，并在3’末端加入胸腺嘧啶构建的。插入位点3’-T突出端可提高PCR产物的连接效率，因为3’-T突出端可以防止载体的自身环化，并且为热稳定性聚合酶产生PCR产物提供匹配碱基。这些聚合酶常常以不依赖模板方式在扩增产物的3’端加上一个脱氧腺苷酸混合物。   pGEM®-T和pGEM®-T Easy高拷贝数载体包含有T7和SP6 RNA聚合酶启动子，其侧翼和多克隆位点区相接，多克隆位点区位于β半乳糖苷酶的α肽编码区内。α肽插入失活允许在指示培养基用颜色直接筛选重组克隆。另外这两个载体的多克隆位点区的限制性酶切位点适用于采用Promega公司Erase-a-Base®系统（产品目录号#E5750）产生一系列巢式缺失体。   
pGEM®-T和pGEM®-T Easy 载体的多克隆位点区含有一些这样的限制性酶切位点，采用这些酶进行单酶切消化即可释放插入片段。如pGEM®-T Easy 载体多克隆区的EcoRⅠ、BstZⅠ和NotⅠ酶切位点。而pGEM®-T 载体多克隆区只有一种这样的酶切位点BstZⅠ。这两种载体也可选用适当的双酶切消化释放插入片段。  
pGEM®-T和pGEM®-T Easy 载体含有丝状噬菌体f1复制起始子，可用于制备单链DNA 

注意事项：

• PCR产物的T-A克隆