磁珠法mRNA核酸纯化试剂盒

• 产品编号：61006      品牌：invitrogen       原厂货号：61006
• 产品分类：DNA和RNA纯化 > RNA纯化 > RNA纯化
• 应用分类：核酸分离纯化与分析 > RNA纯化 > 按RNA类型 > 转录组RNA
  　　　　　核酸分离纯化与分析 > RNA纯化 > 按应用类型 > Northern Blot 分析
  　　　　　核酸分离纯化与分析 > RNA纯化 > 按应用类型 > 用于RT-PCR

其它组分：

描述：

在 15 分钟内分离完整的 mRNA 转录组。 这种 mRNA 分离试剂盒能特异性地 靶向、捕获和纯化总 RNA 制品中的 mRNA 分子。 由于 mRNA 含量在真核总 RNA 样品中仅占约 1-5%，如果可能的话， 推荐直接从粗裂解液中分离 mRNA（请参阅： Dynabeads® Direct mRNA 分离 (Dynabeads® Direct mRNA Isolation) 试剂盒）。 这是因为采用纯化总 RNA 的技术时，产物中有约 80% 的核糖体 RNA，在纯化过程中，mRNA 不得不与核糖体 RNA、转运 RNA、micro RNA、小核仁 RNA 以及小 胞质 RNA 竞争。

• 15 分钟的步骤能获得完整的纯 mRNA
• 高纯 mRNA 分离，cDNA 合成上游的最佳选择
• 高灵敏度的 mRNA 分离可以用超小量的初始样品合成 cDNA 和构建 cDNA 文库 。 （可以用单细胞构建 cDNA 文库 ）。

Dynabeads® mRNA 纯化试剂盒 (Dynabeads® mRNA Purification Kit) 中的 mRNA 纯化微珠能特异性地 靶向、捕获并纯化任何来源的真核总 RNA 样品中的 mRNA 转录组。 弃除不能与微珠结合的核糖体 RNA 和小 RNA 分子（例如 转运 RNA、micro RNA、小核仁 RNA 和小胞质 RNA）。 只捕获多聚腺苷酸化的 RNA（mRNA） 。 可分离出纯 mRNA，无需进行核糖体 RNA 消除。

从任意真核来源的总 RNA 样品中纯化 mRNA：

• 总 RNA 纯化制品血液、血清、血浆、唾液
• 来自细胞、血清和血浆的病毒 poly A+ RNA
• 哺乳动物、两栖动物、鱼和昆虫组织： 脑、肺、肝、肠、 心、肾、垂体、胰、卵巢、肌肉、下丘脑、卵以及全 昆虫，等。
• 植物组织： 全植物、芽、保卫细胞（单细胞）、晶胚、花朵、 叶、胚珠、根、种子（糊粉，胚乳）与柱头，等。
• 福尔马林固定、石蜡包埋组织
• 酵母（酿酒酵母）
• 未分离的核酸样品（含 DNA 与总 RNA）

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mRNA 适用于所有下游分子操作：

• 基因克隆
• cDNA 合成、cDNA 文库构建
• RT-PCR、定量 RT-PCR
• RPA-核糖核酸酶保护分析
• 削减杂交
• 点/狭线杂交
• 引物延伸
• SAGE、RACE 等

无柱系统确保最高的转录组回收率：

• 通过运动的磁珠以物理方式捕获 mRNA
• 快速而温和的磁处理过程
• 在高离心力的旋转中不损失 mRNA
• 洗脱过程中无 mRNA 吸附到柱膜上

构建 cDNA 文库之前理想的 mRNA 纯化方法

• 确保最高的转录组回收率和富集度
• 捕获的转录组远多于需要在 mRNA 分离上游进行总 RNA 分离的方法

Dynabeads 在溶液中具有很强的运动性，使 mRNA 捕获表面 在 mRNA 捕获过程中能自由且持续地与全部样品相互作用。 强磁场能快速将 Dynabeads 吸到管壁，因此可以用移液器轻松 彻底地去除上清。 洗涤步骤按类似方式进行 。 可洗脱出没有其它类型 RNA 污染的纯 mRNA。

多种洗脱选择：

• 可选择以 5µl
• 以上的任何体积洗脱 mRNA：
  – 下游过程中的酶反应不因 Dynabeads 而受抑制
  – 能直接在微珠上进行 cDNA 合成，构建可重复使用的 固相 cDNA 文库

原厂资料：

The Dynabeads® mRNA Purification Kit rapidly isolates the mRNA transcriptome in typically 15 minutes, delivering pure, intact mRNA. The kit is designed to specifically target, capture, and purify mRNA molecules from total RNA preparations.

• Obtain pure mRNA in typically 15 minutes
• Recover and enrich the transcriptome efficiently
• Prepare mRNA that is suitable for nearly every downstream application

Pure, Rapid mRNA Isolation
The Dynabeads® mRNA Purification Kit contains magnetic beads for the isolation of the mRNA transcriptome from any total eukaryotic RNA preparation (Figure 1). Dynabeads® magnetic beads are uniform in size and highly mobile in solution (Figure 2). This enables the bead capture surface to quickly and continuously interact with the entire total RNA sample during the mRNA capture phase. The ribosomal RNA and small RNA molecules (transfer RNA, microRNA, small nucleolar RNA, and small cytoplasmic RNA) do not bind to the beads and are discarded. Only polyadenylated RNA species (mRNA) are captured resulting in cleaner, more sensitive results (Figure 3). Within about 15 minutes, pure mRNA is isolated and ready for use in downstream applications.

A Straightforward Enrichment Procedure
The Dynabeads® mRNA Purification Kit uses a robust affinity purification principle for the enrichment of polyadenylated mRNA. Superparamagnetic Dynabeads®, coupled to oligo-(dT)₂₅, are first equilibrated with Binding Buffer, and then mixed with purified total RNA. The beads are then washed to remove contaminating RNA species, and then mRNA is eluted in as little as 5 µl of 10 mM Tris-HCl. The entire process is facilitated by the use of a neodymium magnet (purchased separately), which allows for the quick and efficient immobilization of the magnetic beads during buffer changes.

RNA is suitable for all downstream molecular applications including:
• Gene cloning 
• cDNA synthesis, cDNA library construction 
• RT-PCR, Quantitative RT-PCR 
• RPA (Ribonuclease Protection Assay) 
• Subtractive Hybridization 
• Dot/slot Hybridization 
• Primer extension