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描述:
核糖核酸酶 H (RNase H) 是核糖核酸内切酶,特异性地降解 RNA-DNA 杂合体的 RNA 链,产生末端为 5´ 磷酸的寡核糖核苷酸和单链 DNA。
应用: 在第二链 cDNA 合成过程中去除 mRNA (1)。 在有寡聚脱氧胸苷酸参与的反应中从 mRNA 去除 poly(A) 序列 (2)。 寡聚脱氧核糖核苷酸介导的 RNA 剪切 (3)。
来源: 纯化自表达质粒所带大肠杆菌 RNase H 基因的大肠杆菌。
性能和质量测试: 核糖核酸酶、非特异性脱氧核糖核酸内切酶、3´ 和 5´ 脱氧核糖核酸外切酶。
单位定义: 一个单位的酶量可以在 37°C 的反应体系中,将 1 nmol 3 H 标记 poly(A)•poly(dT) 中的 RNA 水解成溶于酸的材料。
单位反应条件: 反应物共 50 µl,包括 20 mM Tris-HCl (pH 7.5)、0.1 M KCl、10 mM MgCl2、0.1 mM DTT、5% (w/v) 蔗糖、0.5 nmol 用 3 H 标记的 poly(A)•poly(dT) 和酶,温度 37°C,时间 20 分钟。
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