BaculoDirect™ 杆状病毒表达系统 (BaculoDirect™ Baculovirus Expression System) 是一种功能强大的通用型真核系统，用于在昆虫细胞中高水平表达蛋白质。 Gateway® 技术与杆状病毒表达的结合使 BaculoDirect™ 系统成为最快、最简单的重组杆状病毒生产方法。
工作原理
BaculoDirect™ 线性 DNA (BaculoDirect™ Linear DNA)（杆状病毒基因组）经过设计，包括 attR 位点，可以用 Gateway® 入门克隆快速有效地进行重组。 使用只需一小时的简单 LR 反应，即可将来自入门克隆的目的基因重组进 BaculoDirect™ 线性 DNA（图 1）。 所得的反应混合物包含携带目的基因的重组杆状病毒，可直接用于转染昆虫细胞。 无需转化细菌和分离大杆粒，也无需将转染载体和线性杆状病毒 DNA 共转染进昆虫细胞。 手动操作时间因此显著减少。 可在一周内分离纯化的杆状病毒。
Gateway® 线性 DNA
BaculoDirect™ 线性 DNA 设计用于使用 Gateway® 入门克隆进行快速克隆，然后在 Sf9 或 Sf21 昆虫细胞中进行表达（图 2）。 线性 DNA 具有以下特点：
具有多角体蛋白强启动子，可进行高水平表达
具有 R 位点，可与任何含有 attL 侧翼序列的 Gateway® 入门克隆进行高效重组
具有 TK 基因，可以使用更昔洛韦 (ganciclovir) 进行阴性筛选
具有 N-末端 V5-His 标签，可使用 Invitrogens 抗-V5 抗体进行检测，用镍螯合树脂进行纯化（BaculoDirect™ N-端线性 DNA）
具有 TEV 蛋白酶切割位点，用于在纯化后去除 V5-His 标签（BaculoDirect™ N-端线性 DNA）
具有 C-末端 V5-His 标签，可使用 Invitrogens 抗-V5 抗体进行检测，用镍螯合树脂进行纯化（BaculoDirect™ C-端线性 DNA）
原厂资料：
注意事项：
The BaculoDirect™ Transfection Kits include five 0.3 µg vials of BaculoDirect™ Linear DNA, 125 µl of Cellfectin® transfection reagent, and ganciclovir. Store the BaculoDirect™ Linear DNA, and Cellfectin® at +4°C. All components are guaranteed stable for 6 months if stored properly
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