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概念: 印迹技术是指将待测核酸分子结合到一定固相支持物上的方法。

southern印迹

概念:将电泳分离的DNA片段转移到一定的固相支持物上的过程。

过程:DNA分子被限制酶切，经琼脂糖凝胶电泳，将DNA片段按照分子量大小分离，然后将含DNA片段的琼脂糖凝胶变性，将其中单链DNA转移到硝酸纤维滤膜或者其他固相支持物上。而DNA片段的相对位置保持不变。可做下一步杂交反应。

northern印迹

概念:将RNA变性及电泳分离后，将其转移到固相支持物上的过程。

不能用碱变性，防止水解。用甲醛变性。

southern印迹的步骤:

1. 从组织中提取DNA

2. 用特定的核酸内切酶酶切

3. 琼脂糖凝胶电泳

4. 碱变性

5. 中和反应

6. 转膜

7. 固定

8. 杂交

9. 杂交信号检测

northern印迹的步骤:

1. 从细胞中提取总RNA

2. 甲醛凝胶变性电泳

3. 转膜

4. 固定

5. 杂交

6. 杂交信号检测

western印迹的步骤

1. 蛋白质样品制备

2. SDS-PAGE电泳

3. 转膜

4. 封闭

5. 一抗孵育

6. 二抗孵育

7. 显色

invitrogen