实验名称：聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA

描述：

        聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的凝胶，由丙烯酰胺单体和交联剂N’，N’-亚甲双丙烯酰胺在催化剂过硫酸铵和加速剂TEMED作用下聚合而成。聚合时，由单体丙烯酰胺聚合成链状物，由交联剂将链与链间交联成网状，形成立体的不溶于水的凝胶。

       聚丙烯酰胺凝胶与琼脂糖凝胶相比有3个主要优点：1.分辨能力很强，长度仅相差1bp的DNA分子也能区分；2.所能装载的DNA量大；3.从聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA的纯度很高。

       用于分离DNA的聚丙烯酰胺凝胶有两种：一种是用于分离和纯化双链DNA片段非变性聚丙烯酰胺凝胶，通常以低电压（1-8V/cm）进行电泳，以防止小片段DNA的变性，DNA迁移率与分子大小和存在方式（如线性、缺口环化、超螺旋等）有关；另一种是用于分离和纯化DNA的变性聚丙烯酰胺凝胶，变性DNA在这些凝胶中的迁移速率几乎与碱基组成及序列完全无关，仅与相对分子质量对数值成反比。

       聚丙烯酰胺凝胶电泳后，可用溴化乙锭、银染法、放射自显影等方法检测DNA条带。银染法的原理是Ag⁺与核酸形成稳定复合物，然后用甲醛使Ag⁺还原成银颗粒。Na₂S₂O₃作为Ag⁺的络合剂，可减少非特异染色。硝酸银等试剂可使聚丙烯酰胺凝胶上的DNA染成黑褐色。

 

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