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实验名称:变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)

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描述:

    SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据蛋白亚基分子量不同来进行蛋白分离的。SDS是一种 去垢剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破环蛋白分子的二、三级结构。而强的还原剂如巯基乙醇等能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白-SDS胶束,所带的负电荷大大超过了蛋白原有的电荷量,这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异。可与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其空间折叠结构剂后,电荷因素可被忽略。蛋白亚基的迁移率取决于亚基分子量。

 

 



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