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脂质体转染

      脂质体(liposomes)的概念最早是被英国科学家Banghan等提出的。当磷脂分散在水中时形成多层囊泡,而且每一层均为脂质双分子层,各层之间被水相隔开。这种由脂质双分子层组成,内部为水相的闭合囊泡为脂质体。

组成;脂质体由磷脂和胆固醇组成,磷脂由一个亲水的头部和两个疏水的尾部组成。

       脂质体((Iiposome)作为体内和体外输送载体的工具,已经研究的十分广泛,用合成的阳离子脂类包裹DNA,同样可以通过融合而进入细胞。使用脂质体将DNA带入不同类型的真核细胞。

        阳离子脂质体表面带正电荷,能与核酸的磷酸根通过静电作用将DNA分子包裹人内,形成DNA一脂复合体,也能被表面带负电荷的细胞膜吸附,再通过膜的融合或细胞的内吞作用,偶尔也通过直接渗透作用,DNA传递进入细胞,形成包涵体或进入溶酶体 其中一小部分DNA能从包涵体内释放,并进入细胞质中,再进一步进入核内转录、表达。

脂质体在体内与细胞的作用过程;分吸附(adsorption)、脂交换(lipid exchang),内吞(endocytosis),融合(fusion)四个阶段。

吸附是脂质体与细胞的作用的开始,受粒子大小和表面电荷等因素影响;

脂交换是指脂质体的脂类与细胞膜上的脂类发生交换;

内吞作用是指脂质体被作为外来的异物吞噬。

融合指脂质体的膜与细胞膜融合进入细胞内。

脂质体转染的示意图;

 

       利用脂质体转染法最重要的时防止其毒性,脂质体与质粒的比例,细胞的浓度以及转染的时间长短和培养基中的血清含量都是影响转染效率的重要问题。

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