转染(transfection)指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。 细胞化学转染
常规转染技术可分为两大类，一类是瞬时转染，一类是稳定转染（永久转染）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中，因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数，产生高水平的表达，但通常只持续几天，多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说，超螺旋质粒DNA转染效率较高，在转染后24-72小时内（依赖于各种不同的构建）分析结果，常常用到一些报告系统如荧光蛋白，β半乳糖苷酶等来帮助检测。后者也称稳定转染，外源DNA既可以整合到宿主染色体中，也可能作为一种游离体（episome）存在。尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高。外源DNA整合到染色体中概率很小，大约1/104转染细胞能整合，通常需要通过一些选择性标记，如来氨丙基转移酶（APH；新霉素抗性基因），潮霉素B磷酸转移酶（HPH），胸苷激酶（TK）等反复筛选，得到稳定转染的同源细胞系。 转染技术的选择对转染结果影响也很大，许多转染方法需要优化DNA与转染试剂比例，细胞数量，培养及检测时间等。
随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。
| Transfection Products | Transfection Reagents | Transfection Methods |
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By Sample Type
•质粒 DNA 转染 By Cell Type 按细胞类型 查找转染试剂 |
Designed for effective and efficient nucleic
•Lipofectamine™ LTX Transfection Reagent 所有的转染试剂 |
•脂质体转染 •电穿孔法 •Transient Transfection 瞬时转染 •In Vivo Transfection •Cotransfection 共转染 •稳定转染 •磷酸钙转染 •工业用转染试剂 Large scale protein production |
筛选用抗生素
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转染目标为真核细胞或其原生质体。因此请根据需要选择合适的抗生素 |
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Resources
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